恒温隔绝式荧光PCR检测非洲猪瘟病毒核酸方法的建立

• 作者: 陈雪蓉 徐林 王远微 汤承 岳华
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 非洲猪瘟病毒 恒温隔绝式荧光PCR 现场检测
• 年，卷（期）: 2022,（3）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 80-84
• 页数: 5页
• 分类号: S851.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2022.03.018

摘要

恒温隔绝式荧光PCR(iiPCR)是一种简便、快速及可使用于现场检测的荧光PCR方法.本研究采用农业农村部推荐的检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)核酸的荧光定量PCR方法的引物和探针,通过对引物、探针、Taq酶等反应体系的优化,建立了基于恒温隔绝式荧光PCR的ASFV检测方法.所建立的方法可特异性检出ASFV核酸,对猪常感染的其他6种病毒核酸进行检测,结果均为阴性;检测下限为2.55 copies/μL,组内和组间变异系数均<2％.100份临床样本的检测结果均与农业农村部推荐的荧光定量PCR方法检测结果一致.综上,本研究建立的ASFV核酸iiPCR检测方法的特异性、稳定性及敏感度与传统荧光定量PCR方法一致,实现了ASFV检测的规范化和现场化,为ASFV的快速检测提供了可靠手段.