携带CRISPR/Cas9的重组腺联病毒对伪狂犬病病毒感染小鼠的治疗效应

• 作者: 李兆龙 张惠芳 丰志华 方舟
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪伪狂犬病病毒 CRISPR/Cas9 腺联病毒 治疗
• 年，卷（期）: 2022,（3）
• 所属期刊栏目: 预防兽医|PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
• 页码范围: 834-846
• 页数: 13页
• 分类号: S852.659.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2022.03.016

摘要

猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)是猪伪狂犬病的病原.目前,针对该病毒有较多成熟的商品化疫苗,但病毒变异频繁,因而在生猪养殖中伪狂犬病的发生仍然较为普遍.如何清除宿主体内野毒是防控该病的关键所在.应用腺联病毒携载CRISPR/Cas9系统,以小鼠为动物模型,针对PRV的TK基因、gE基因和VP16基因进行剪切,减弱PRV毒力和复制能力,以期清除小鼠体内的PRV.结果表明,成功构建带有CRISPR/Cas9表达系统及相应sgRNA的pX601重组质粒(pXTK、pXGE、pXVP16);并包装成具有基因编辑功能的AAV-gE、AAV-VP16和AAV-TK病毒;经细胞水平和小鼠的感染试验,证实该方法能明显降低细胞和小鼠体内的PRV载量,并且延长小鼠存活时间,提高小鼠成活率,该治疗结果与治疗次数呈正相关.该小鼠模型的研究结果为猪伪狂犬病的临床治疗提供了新的借鉴.