草海桐铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆及序列分析

• 作者: 张静文 张力文 严云香 常义 陈艳 李欣勇
• 来源期刊: 西南农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 草海桐 Cu/Zn-SOD 基因克隆 序列分析
• 年，卷（期）: 2022,（2）
• 所属期刊栏目: 园艺·农业生态环境|HORTICULTURE·AGRICULTURAL ECO-ENVIRONMENT
• 页码范围: 425-431
• 页数: 7页
• 分类号: Q943.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.16213/j.cnki.scjas.2022.2.024

摘要

[目的]铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)在保护细胞和组织免受氧化损伤方面起重要作用.对滨海植物草海桐盐胁迫诱导的Cu/Zn-SOD进行克隆和序列分析,为揭示草海桐适应盐碱环境提供理论依据.[方法]以盐胁迫的草海桐为材料,运用RACE技术克隆草海桐Cu/Zn-SOD,命名为SsCSD,采用生物信息学方法进行序列分析,构建pBinGlyRed-SsCSD重组质粒.[结果]通过RACE技术获得SsCSD基因全长共1148 bp,其最大开放阅读框(ORF)为687 bp,编码228个氨基酸.氨基酸保守结构域分析表明,该序列具有铜锌超氧化物歧化酶保守结构域,属于SOD家族.生物信息学分析表明其定位于叶绿体中,氨基酸序列分析显示其与已知植物叶绿体Cu/Zn-SOD的氨基酸残基高度同源.同时将SsCSD基因与植物表达载体pBinGlyRed进行重组,并成功转入农杆菌GV3101中.[结论]草海桐铜锌超氧化物歧化酶氨基酸序列与同源物种相似度高,在进化上高度保守,对进一步通过转基因验证该酶生物学功能具有重要意义.