外源性神经肽CART对大鼠海马神经元氧化应激的抵抗作用及机制研究

• 作者: 杨成迎 林海烂 黄子晴 王乃秀 汪锴 甘玲
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 神经肽 海马神经元 氧化应激 BDNF/trkB 凋亡信号通路
• 年，卷（期）: 2022,（4）
• 所属期刊栏目: 基础兽医|BASIC VETERINARY MEDICINE
• 页码范围: 1231-1240
• 页数: 10页
• 分类号: Q539.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2022.04.023

摘要

旨在研究外源性神经肽可卡因-苯丙胺调节转录因子(cocaine-and amphetamine-regulated transcript,CART)抵抗海马神经元氧化应激的效果及机制.本研究取初生24 h内大鼠海马进行神经元的原代培养,经纯度检测后,用200 μmol.mL-1过氧化氢诱导以构建氧化应激模型.在此基础上,分析CART对神经元活率、ATP含量、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)和凋亡通路相关基因以及trkB基因表达的影响,并对trkB基因与凋亡相关蛋白和基因的表达进行相关性分析.结果显示,与对照组相比,H2O2组中的神经元活率及ATP含量极显著降低(P＜0.01),MMP值显著降低(P＜0.05);与H2O2组相比,添加不同浓度的CART使海马神经元活率、ATP含量和MMP值显著增加(P＜0.05).与对照组相比,H2O2组中bax、caspase-3的mRNA水平极显著增加(P＜0.01),bcl-2(P＜0.01)、trkB(P＜0.05)的 mRNA水平分别极显著和显著降低;与H2O2组相比,CART+H2 O2组中bcl-2的mRNA水平极显著升高(P＜0.01),而trkB的mRNA水平显著升高(P＜0.05),同时bax的mRNA水平显著降低(P＜0.05),而caspase-3 的 mRNA 水平则极显著降低(P＜0.01).Western blot分析结果显示,与对照组相比,H2O2组中bax、caspase-3的蛋白质水平显著升高(p＜0.05),bcl-2、trkB的蛋白质水平显著降低(P＜0.05);与H2 O2组相比,CART+H2O2组中bcl-2、trkB的蛋白质水平显著升高(P＜0.05),而bax、caspase-3的蛋白质水平显著降低(P＜0.05).相关性分析结果显示,trkB基因与bax、caspase-3基因的表达呈显著负相关,而与bcl-2基因的表达呈显著正相关.结果提示,CART在增加氧化应激海马神经元中trkB基因表达水平的同时,可通过削弱凋亡信号通路抵抗海马神经元氧化应激.