miR-423-5 p通过调控UCHL1表达对H2 O2诱导的人晶状体上皮细胞损伤的影响

• 作者: 孙小叶 邓展峰 常早上
• 来源期刊: 中国老年学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: miR-423-5p 泛素羧基末端水解酶L1 人晶状体上皮细胞 氧化应激 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2022,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 693-697
• 页数: 5页
• 分类号: R776.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9202.2022.03.051

摘要

目的 探讨miR-423-5p对过氧化氢(H2O2)诱导的人晶状体上皮细胞损伤的影响及作用机制.方法 采用H2 O2诱导人晶状体上皮细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测细胞中miR-423-5p和泛素羧基末端水解酶(UCH)L1 mRNA表达水平,Western印迹检测UCHL1、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平,酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清液中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽还原酶(GSH-Px)水平,流式细胞仪检测细胞凋亡.转染miR-423-5p抑制剂或UCHL1过表达载体至人晶状体上皮细胞,上述相同方法检测干扰miR-423-5p表达或UCHL1过表达对H2 O2诱导的人晶状体上皮细胞氧化应激及凋亡的影响.双荧光素酶报告基因实验验证miR-423-5p与UCHL1靶向关系.结果 H2O2诱导可促进人晶状体上皮细胞凋亡、MDA和miR-423-5p表达及Bax蛋白表达(P<0.05),抑制细胞SOD和GSH-Px表达、UCHL1 mRNA和蛋白表达及Bcl-2蛋白表达(P<0.05).干扰miR-423-5p或过表达UCHL1均可抑制人晶状体上皮细胞凋亡、MDA和Bax表达(P<0.05),促进细胞SOD和GSH-Px表达及Bcl-2蛋白表达(P<0.05).miR-423-5p靶向负调控UCHL1表达,抑制UCHL1表达逆转了干扰miR-423-5p表达对人晶状体上皮细胞凋亡、MDA和Bax表达的抑制作用及对SOD、GSH-Px和Bcl-2蛋白表达的促进作用.结论 miR-423-5p可能通过抑制UCHL1表达促进H2O2诱导的人晶状体上皮细胞氧化应激和凋亡,保护人晶状体上皮细胞免受H2 O2损伤.