花鲈Phoenixin-20基因克隆及饥饿复投喂对其表达的影响

• 作者: 李太初 邱丽华 张瑞琼 闫路路 赵超 张博 张博 乔秀亭 王鹏飞
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 花鲈 LmPNX-20基因 饥饿复投喂 摄食调节
• 年，卷（期）: 2024,（9）
• 所属期刊栏目: 水产生物技术与遗传育种
• 页码范围: 145-153
• 页数: 9页
• 语种: 中文

摘要

【目的】明确花鲈Phoenixin-20基因（LmPNX-20）是否参与花鲈的摄食调控过程，进而揭示PNX-20在鱼类摄食调节机制中的作用，同时为丰富和完善花鲈内分泌调控网络提供理论依据。【方法】通过PCR和RACE克隆LmPNX-20基因序列，采用ExPASy、SignalP 5.0、ProtScale、NetPhos 3.1及ClustalX等在线软件进行生物信息学分析，并以实时荧光定量PCR检测分析LmPNX-20基因在花鲈各组织中的表达特征及不同饥饿复投喂策略[正常投喂（F）、饥饿3 d(H3)、饥饿3 d复投喂1 d(R3-1)、饥饿3 d复投喂2 d(R3-2)、饥饿3 d复投喂3 d(R3-3)，以及饥饿7 d(H7)、饥饿7 d复投喂1d(R7-1)、饥饿7d复投喂2d(R7-2)、饥饿7d复投喂3d(R7-3)]对LmPNX-20基因表达的影响。【结果】LmPNX-20基因开放阅读框（ORF）长度为210 bp，共编码69个氨基酸残基；其编码蛋白分子量为7.87 kD，理论等电点（pI）为9.85。LmPNX-20氨基酸序列含有5个磷酸化位点，但不存在信号肽；LmPNX-20氨基酸序列与硬骨鱼类的PNX-20氨基酸序列相似性较高，为69.70%～89.86%。LmPNX-20基因在花鲈脑组织中呈广泛表达分布，尤其在垂体和下丘脑中的相对表达量较高。经饥饿复投喂处理后花鲈幼鱼全脑组织中的LmPNX-20基因表达发生明显变化，在经历3和7 d饥饿复投喂1 d的花鲈幼鱼全脑组织中LmPNX-20基因的相对表达量显著上调（P<0.05）；且与饥饿3 d复投喂的花鲈幼鱼相比，饥饿7 d复投喂的花鲈幼鱼全脑组织LmPNX-20基因表达均呈上调趋势。【结论】LmPNX-20基因在鱼类的进化过程中较保守，且在生长轴（下丘脑、垂体和肝脏）和生殖轴（下丘脑、垂体和性腺）有较高表达水平，可能参与花鲈的生长及生殖等生理过程。不同饥饿复投喂处理影响花鲈幼鱼全脑组织LmPNX-20基因的表达，复投喂后该基因表达量明显升高，说明LmPNX-20基因对花鲈幼鱼摄食调控具有一定促进作用。