Box-Behnken设计—响应面法优化地参总三萜酸纯化工艺

• 作者: 李金金 叶明燕 姚欢 吴应梅 周浓
• 来源期刊: 南方农业学报
• 学科: 医学
• 关键词: 地参 总三萜酸 大孔树脂 纯化工艺 响应面法
• 年，卷（期）: 2024,（6）
• 所属期刊栏目: 专题：药用植物
• 页码范围: 117-130
• 页数: 14页
• 语种: 中文

摘要

【目的】建立响应面模型优化合适树脂下地参总三萜酸的纯化工艺，为研究地参总三萜酸活性提供技术参考。【方法】运用Box-Behnken设计方法，采用大孔树脂吸附纯化地参总三萜酸，以吸附率和解吸率为指标，测定5种大孔树脂(AB-8、D101、HPD600、DA201和S-8型)对地参总三萜酸的纯化效果。以上样浓度、上样流速、洗脱浓度和洗脱流速为自变量，回收率为因变量，运用响应面法优化地参总三萜酸纯化工艺参数。【结果】最佳显色条件：显色温度60℃，5%香草醛—冰乙酸0.2 m L，高氯酸0.4 m L，检测波长545 nm。AB-8型树脂对地参总三萜酸的吸附和解吸效果最佳，解吸率为88.61%，吸附率为70.54%。上样体积在40 mL,80%乙醇100 mL为最佳洗脱体积。建立的回归方程：Y=0.6887+0.0196A-0.0085B-0.0287C+0.0052D+0.0299AB-0.0107AC-0.0122AD+0.0128BC+0.0211BD+0.026A2-0.0765B2-0.0877C2-0.0932D2(A为上样浓度，B为上样流速，C为洗脱浓度，D为洗脱流速，Y为总三萜酸回收率)。由Box-Behnken方差分析结果可得，上样浓度和洗脱浓度2个因素，以及上样浓度与上样流速的交互作用、洗脱浓度与洗脱流速的交互作用对地参总三萜酸回收率影响极显著(P<0.01)，上样流速与洗脱流速的交互作用对总三萜酸回收率影响显著(P<0.05),4个因素对地参总三萜酸回收率影响顺序为洗脱浓度>上样浓度>上样流速>洗脱流速。优化后的地参总三萜酸纯化工艺：上样浓度0.66 mg/mL、上样流速2 BV/h、洗脱浓度80%、洗脱流速2 BV/h，在此条件下，总三萜酸平均回收率为67.37%。【结论】建立的回归模型可用于地参总三萜酸纯化工艺的预测；AB-8型大孔树脂对地参总三萜酸的分离纯化效果较好，适用于总三萜酸物质的纯化。