摘要:

目的:采用十二指肠-食管吻合术(胃全切)建立大鼠十二指肠-食管非酸反流模型,观察加味旋覆代赭汤对模型食管肠化及CDX2、DLK1表达的影响.方法:成年雄性Wistar大鼠80只,随机分为假手术组、模型组、加味旋覆代赭汤组及铝碳酸镁片(达喜)组,每组20只.除假手术组外,其余三组均采用十二指肠-食管吻合术(胃全切)建立大鼠十二指肠-食管非酸反流模型,建模25周时,加味旋覆代赭汤组经口灌服加味旋覆代赭汤(相当于30 g生药/kg),每日1次,连续3周;达喜组经口灌服达喜药液(300 mg/kg),每日1次,连续3周;模型组给予同体积蒸馏水经口灌服,每日1次,连续3周.治疗3周后,连同假手术组,共4组动物,麻醉状态下打开胸腹腔,剪取食管下段及吻合段,纵行剖开,进行大体观察,对食管下端紧邻吻合口处组织行HE染色,行食管病理组织学检查并评分,另采用免疫组化法进行CDX2及Notch信号分子-DLK1染色,观察其表达情况.结果:大体观察发现模型组食管下段显著增粗,纵行剖开食管,可见下端食管显著增厚,食管下段黏膜呈广泛显著不规则隆起,外观颜色呈白斑样改变;加味旋覆代赭汤组食管大体病理较模型组显著减轻,达喜组食管大体改变较模型组无显著差别.模型组轻、中、重度食管炎发生率分别为2/15(13.33％)、3/15(20.00％)、10/15(66.67％);加味旋覆代赭汤组分别为11/17(64.70％)、3/17(17.65％)、3/17(17.65％),与模型组比较炎症程度显著降低(P<0.01),达喜组分别为3/16(18.75％)、4/16(25.00％)、9/16(56.25％),与模型组差异无显著性(P>0.05).加味旋覆代赭汤组的Barrett食管发生率为2/17(11.8％),显著低于模型组的7/15(46.7％),差异有统计学意义(P<0.05),达喜组为7/16(43.8％),与模型组差异无统计学意义(P>0.05).加味旋覆代赭汤组的CDX2、DLK1表达水平均显著低于模型组(P<0.01),而达喜组与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:加味旋覆代赭汤可通过抑制CDX2及Notch信号分子DLK1表达来抑制肠化,减少非酸反流所致Barrett食管的发生.

摘要:

目的 分析白血病患者DNA结合抑制因子4(ID4)、人类Mut L同源物1(hMLH1)、尾型同源盒转录因子-2(CDX2)基因启动子区异常甲基化及mRNA表达.方法 选取2015年1月—2019年3月中国人民解放军联勤保障部队第九六四医院确诊的白血病患者90例作为研究组,按照白血病类型分为急性髓系白血病(AML)38例、慢性粒细胞白血病(CML)24例、急性淋巴细胞白血病(ALL)28例,并选取同期健康志愿者30例作为健康对照组.比较各组ID4、hMLH1、CDX2基因启动子区异常甲基化及mRNA表达情况.结果 AML、CML、ALL患者ID4基因甲基化发生率分别为73.68％、75.00％、85.71％,明显高于健康对照组的3.33％(χ2=52.683,P<0.001),AML、CML、ALL患者hMLH1基因甲基化发生率分别为57.89％、58.33％、60.71％,明显高于健康对照组的6.67％,差异均有统计学意义(χ2=24.772,P<0.001);AML、CML、ALL患者CDX2基因甲基化发生率均为100.00％,与健康对照组的96.67％比较,差异均无统计学意义(P>0.05).AML、CML、ALL患者ID4、hMLH1、CDX2基因mRNA表达均明显低于健康对照组,差异均有统计学意义(F=349.916、339.255、114.064,P<0.001).结论 白血病患者ID4、hMLH1、CDX2基因启动子区异常甲基化与白血病的发病机制密切相关,ID4、hMLH1基因的mRNA表达受到甲基化的影响,CDX2基因的mRNA表达与甲基化无关.

摘要:

目的 探讨酸刺激促进Barrett食管(Barrett's esophagus,BE)形成的过程中细胞内钙信号的作用.方法 免疫组织化学方法检测比较25对正常人食管粘膜和Barrett食管粘膜中CDX2的蛋白表达变化,细胞实验分为对照组(pH7.4)及酸刺激组(pH5.5),动态钙离子成像技术检测不同pH溶液及内钙螯合剂刺激正常食管粘膜细胞株HEEC后胞内钙浓度的变化.蛋白免疫印迹法检测pH5.5及内钙螯合剂孵育HEEC细胞24 h后CDX2的蛋白表达变化.结果 免疫组织化学结果显示CDX2在正常食管粘膜组织和Barrett食管粘膜组中均有阳性表达,并且Barrett食管中CDX2的表达较正常食管粘膜明显升高,差异有统计学意义(P＜0.001).动态钙离子检测发现与对照组(pH 7.4)相比,pH5.5及pH5.O酸刺激组能明显促进HEEC细胞内的钙离子浓度升高,差异具有统计学意义(P＜0.05),而pH7.0、6.5、6.0等酸刺激组对细胞内钙水平没有明显影响(P＞0.05),pH5.5刺激的同时加入细胞内钙螯合剂BAPTA-AM共同作用,HEEC细胞内增高的钙离子水平能被显著抑制(P ＜0.001);Western blot结果发现,与pH7.4孵育24h相比,HEEC细胞pH5.5孵育24h后CDX2的表达显著上调(P＜0.001),加入细胞内钙螯合剂BAPTA-AM共同作用后,CDX2蛋白表达的上调被明显逆转(P＜0.01).结论 细胞内钙变化是酸暴露上调CDX2表达,促进Barrett食管发生的关键环节.

摘要:

目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)对酸和胆盐诱导的人鳞状细胞凋亡的影响及机制.方法 体外培养人食管鳞状细胞,瞬时转染COX-2 SiRNA载体,48 h后经酸、胆盐及二者混合物处理细胞株,流式细胞术检测细胞凋亡,同时运用蛋白印迹技术检测COX-2、核转录因子-κB(NF-κB)及尾型同源盒转录因子-2(CDX-2)表达.结果 酸、胆盐及二者混合物均诱导细胞凋亡,酸和胆盐的混合物作用最强,基因沉默COX-2后细胞凋亡增加,伴随NF-κB及CDX-2表达降低.结论 基因沉默COX-2可以增加酸和胆盐诱导的人鳞状细胞凋亡,通过COX-2激活NF-κB信号通路及促进CDX-2表达可能是其机制之一.

摘要:

目的:探讨尾型同盒转录子-2(CDX-2)和环氧合酶-2(COX-2)在胃癌组织中的表达及临床意义.方法:采用免疫组织化学EnVision两步法检测CDX-2和COX-2在75例胃癌组织和30例癌旁组织中的表达,分析其与胃癌临床病理特征的关系以及两者的相关性.结果:CDX-2和COX-2在胃癌组织中的阳性表达率分别为53.3%和65.3%,高癌旁组织30.0%(P<0.05)和33.3%(P<0.01).在胃癌组织中表达呈明显负相关(P<0.01).结论:CDX-2和COX-2均参与了胃癌的发生、发展,CDX-2主要在肠型胃癌中表达,CDX-2的低表达与COX-2的高表达有助预测胃癌病情进展的情况.

摘要:

目的：观察牛磺熊去氧胆酸(tauroursodeoxycholic acid，TUDCA)联合柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine，SASP)对小鼠实验性结肠炎的药效作用，初步探讨牛磺熊去氧胆酸干预结肠炎模型的可能机制。方法5%葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium， DSS)诱导小鼠实验性结肠炎模型。药物组给予SASP(500 mg/kg)、TUDCA(100 mg/kg)、TUDCA+SASP灌胃；正常组及模型组给予0.9%氯化钠注射液。1次/d，共8 d。观察小鼠一般状态、疾病活动指数(disease activity index，DAI)、结肠长度改变及病理组织学积分；采用免疫组化SP法检测结肠组织Hes1、Atoh1、Cdx2的表达情况，ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6的表达量。结果正常组、TUDCA组、SASP组、TUDCA/SASP联合组的DAI分别为0.10±0.23、2.37±0.46、2.17±0.55、1.94±0.34，其组织学损伤评分分别为0.00±0.00、6.60±1.71、6.10±1.45、4.5±1.27，均低于模型组(3.43±0.47和9.40±1.26)，差异均有统计学意义(P＜0.01)；TNF-α、IL-6蛋白表达水平，正常组(46.12±8.35) ng/L、(26.89±5.45)ng/L， TUDCA组(56.48±9.02) ng/L、(27.60±4.76) ng/L，SASP组(59.15±11.09) ng/L、(26.42±5.08) ng/L，均低于模型组[(70.64±7.93) ng/L、(35.12±3.51) ng/L]，差异均有统计学意义(P＜0.05)；正常组、TUDCA组Hes1蛋白表达分别为0.26±0.12、0.40±0.10，低于模型组(0.82±0.10)，差异均有统计学意义(P＜0.01)，模型组与SASP组(0.73±0.09)比较，差异无统计学意义(P＞0.05)；Atoh1蛋白、Cdx2蛋白表达，正常组0.48±0.06、0.78±0.08，TUDCA组0.72±0.09、0.58±0.09，均高于模型组(0.32±0.09、0.37±0.07)，差异有统计学意义(P＜0.01)，模型组与SASP组Atoh1(0.30±0.10)比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 TUDCA和SASP组均可有效减轻小鼠结肠炎模型的炎症反应，两药可能存在协同作用，联合用药效果更优。TUDCA干预机制可能与调节炎性因子，抑制Hes1蛋白激活、增加Cdx2蛋白表达有关。