摘要:

目的 探讨高血压患者尿微量清蛋白(MAU)与超敏C反应蛋白(hs-CRP)及其-717A＞G基因多态性的关系.方法 将高血压患者按尿清蛋白水平分为尿正常清蛋白(NMAU)组(75例)和MAU组(56例),另选择健康体检正常者为对照组(60例).免疫浊度法测定各组血浆hs-CRP水平,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测受检者CRP的-717A＞G基因型及等位基因频率,并进行组间比较.结果 3组受检者的收缩压、舒张压、hs-CRP、MAU、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)水平比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).其中NMAU组与MAU组的收缩压、hs-CRP、MAU、TG水平比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).Logistic回归分析显示hs-CRP升高是高血压患者MAU发生的危险因素(OR=3.107).MAU组与NMAU组受检者比较,CRP-717A＞G基因型AA、AG及GG频率分布差异无统计学意义(χ2=3.621,P＞0.05);等位基因A、G频率分布差异有统计学意义(χ2=3.931,P=0.047).结论 hs-CRP升高是高血压患者MAU发生的独立危险因素,CRP-717A等位基因可能是高血压患者MAU发生的易患基因.

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目的:研究血小板内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1)基因Leu 125 Val分子变异与中国人群冠心病的关联.方法:选择90例冠心病患者(冠心病组)及年龄、性别相匹配的115例正常者(对照组),用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测其PECAM-1基因型.比较2组基因型及等位基因频率分布.结果:冠心病组V/V基因型频率(40.00%)明显高于对照组(23.48%),差别有统计学意义(P＜0.05);与对照组相比,冠心病组V等位基因频率(58.89%)明显升高,L等位基因频率(41.11%)明显降低(P＜0.05);吸烟使V/V基因型者冠心病发病危险度由2.17上升至3.50(P＜0.05).结论:PECAM-1基因Leu 125 Val分子变异与冠心病相关,V/V基因型可能是中国人群冠心病的遗传易患因子.

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对64例冠状动脉造影确诊的冠心病患者,采用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性检测对氧磷酶1(PON1)基因Gln/Arg192多态性.比较不同冠状动脉病变支数、不同狭窄程度冠心病患者PON1基因型及等位基因频率分布.结果 不同冠状动脉病变支数及不同冠状动脉的狭窄程度冠心病患者PON1基因型及等位基因频率分布无统计学差异.认为冠状动脉病变支数、冠状动脉狭窄程度与PON1 A、B等位基因频率无关.

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本发明公开了一种两探针实时荧光检测丙型肝炎病毒核糖核酸的方法，包括引物和探针的制备、制备反应液、制备RNA标准品、荧光定量检测等步骤。本发明大大提高了HCVRNA检测的灵敏度低、特异性。

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建立了重盐、异丙醇提取视紫红质(RHO)基因DNA序列检测方法. 结果显示正常人RHO第5外显子基因所选277碱基排列与Nathans-Hogness报道的基因密码一致.RHO基因直接提取法不能用于序列测定.该法与酚提取法相比,时间缩短数个小时,成本降低50%.

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目的建立实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RFQ-PCR)检测HBV-DNA含量的方法,探讨其在乙型肝炎预防、诊断、治疗及判断病情等方面的临床应用价值.方法在HBV S基因高保守区设计了特异性的引物和探针,利用TaqMan探针的基本原理,PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,根据标准品建立的标准曲线,由软件自动计算出待测样本中HBV-DNA的准确含量.结果 220例临床样本的检测结果显示,乙肝大三阳患者HBV-DNA阳性率(98.8%)显著高于其它各组(P＜0.01),病毒平均含量为7.52±0.43 copies/ml;小三阳患者HBV-DNA阳性率低于大三阳组(P＜0.01),但平均病毒含量与大三阳组无差异(P＞0.05),高达7.41±0.26 copies/ml;单独HBsAg阳性和单独HBsAb阳性组HBV-DNA阳性率分别为56.4%,19.2%,平均病毒含量分别为5.35±0.32 copies/ml,4.02±0.31 copies/ml;80例献血员血清仍有3例HBV-DNA阳性,其病毒含量低于其它各组.结论 RFQ-PCR检测HBV-DNA含量比ELISA法具有更好的灵敏度和特异性,能准确反映HBV在体内的复制情况,对临床上抗病毒药物的选择和判断疾病的预后意义重大.

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目的探讨G蛋白偶联受体激酶4基因变异与原发性高血压的关联.方法应用等位基因特异性PCR结合实时荧光分析的方法,对中国江苏南通地区102例健康人,93例原发性高血压患者的CRK4多态位点A486V进行基因分型,并进行关联分析.结果 V等位基因频率原发性高血压组(56.9%)显著高于正常血压对照组(44.1%),差别有统计学意义(P＜0.05),高血压组中V/V基因型频率(32.4%)明显高于对照组(18.3%,P＜0.05).结论在中国江苏南通地区汉族人中,GRK4多态位点A486V可能与原发性高血压的发病有关,V/V基因型是遗传易患因子.

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目的:研究中国人载脂蛋白E(ApoE)基因多态性及血管紧张素转换酶(ACE)基因插入/缺失(I/D)多态性与冠心病的关联.方法:分别用PCR-RFLP及PCR技术检测了129例冠心病患者及90例健康人ApoE,ACE基因型.结果:冠心病组ε3/4基因型及ε4等位基因频率显著高于对照组,ε3/3基因型及ε3等位基因频率则显著低于对照组;ACE各基因型及等位基因频率两组间无显著差异;在ε4携带情况下,不同ACE基因型冠心病危险度不同,DD型＞ID型,而Ⅱ型似有一定的保护作用.结论:ε4等位基因是冠心病的遗传易患因子;ACE基因与冠心病发病无显著关联,但对ε4等位基因有一定的"修饰"作用.

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目的 探讨高血压患者尿微量清蛋白(MAU)与超敏C反应蛋白(hs-CRP)及其-717A＞G基因多态性的关系.方法 将高血压患者按尿清蛋白水平分为尿正常清蛋白(NMAU)组(75例)和MAU组(56例),另选择健康体检正常者为对照组(60例).免疫浊度法测定各组血浆hs-CRP水平,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测受检者CRP的-717A＞G基因型及等位基因频率,并进行组间比较.结果 3组受检者的收缩压、舒张压、hs-CRP、MAU、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)水平比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).其中NMAU组与MAU组的收缩压、hs-CRP、MAU、TG水平比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).Logistic回归分析显示hs-CRP升高是高血压患者MAU发生的危险因素(OR=3.107).MAU组与NMAU组受检者比较,CRP-717A＞G基因型AA、AG及GG频率分布差异无统计学意义(χ2=3.621,P＞0.05);等位基因A、G频率分布差异有统计学意义(χ2=3.931,P=0.047).结论 hs-CRP升高是高血压患者MAU发生的独立危险因素,CRP-717A等位基因可能是高血压患者MAU发生的易患基因.

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目的以丙型肝炎病毒(HCV)为例,介绍一种简便快速的RNA定量标准品的制备方法.方法RT-PCR扩增目的片段,产物以pGEM-T载体连接并转化感受态大肠杆菌DH5α,经筛选和测序鉴定,阳性质粒体外转录合成cRNA,准确定量后作为标准品.结果RNA标准品具有较大的线性范围(109copies/ml～10 copies/ml),批内和批间重复性也较好,CV分别为1.68%～5.97%和6.40%～10.581%.结论此法制备的RNA标准品具有较好的检测灵敏度和特异性,适合临床推广应用.