摘要:

本发明涉及真核生物翻译起始因子4H（eIF4H）基因沉默抑制肿瘤细胞生长的方法及其应用。具体地，本发明以真核生物翻译起始因子4H（eIF4H）为靶基因，利用慢病毒介导的RNA干扰技术使该基因沉默，创建了一个能够在体外有效的抑制小鼠血癌细胞生长的方法。该方法为白血病的发生和细胞分化机理的研究提供了新的视角，为抗肿瘤药物的研究提供了潜在的靶点。

摘要:

本发明公开了一种UPF0538蛋白多克隆抗体的获取方法，该方法通过设计的特异性引物，通过RT-PCR技术对UPF0538基因进行克隆测序，再进行原核表达载体pET-28a(+)-UPF0538的构建，然后进行了UPF0538原核表达；最后将UPF0538蛋白纯化到85%以上后进行UPF0538多克隆抗体的制备与纯化。本发明获得的产品效价高，特异性好，可以满足UPF0538蛋白的相关测定，弥补了UPF0538的多克隆抗体的研究空白，为研究UPF0538蛋白提供材料。

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本发明涉及真核生物翻译起始因子4H（eIF4H）基因沉默抑制肿瘤细胞生长的方法及其应用。具体地，本发明以真核生物翻译起始因子4H（eIF4H）为靶基因，利用慢病毒介导的RNA干扰技术使该基因沉默，创建了一个能够在体外有效的抑制小鼠血癌细胞生长的方法。该方法为白血病的发生和细胞分化机理的研究提供了新的视角，为抗肿瘤药物的研究提供了潜在的靶点。

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目的 利用盐酸苯肼诱发小鼠产生网织红细胞的最佳条件选择.方法 每天背部皮下给ICR和BALB/c小鼠注射1％盐酸苯肼100～400 μL,连续9 d.每天尾静脉取血,利用煌焦油蓝染色,观察染色后网织红细胞的诱发效率并进行统计学分析.结果 注射200 μL盐酸苯肼的小鼠诱发的网织红细胞状态最好,第4天诱发效率最高,可达83.16％±3.41％;注射300 和400 μL盐酸苯肼的小鼠诱发的网织红细胞形态不规则,细胞状态较差小鼠很快死亡.结论 ICR小鼠及BALB/c小鼠网织红细胞诱发的最佳条件为:体质量25～35 g的小鼠每天注射200 μL 1％盐酸苯肼,连续注射4d.

摘要:

目的 研究pirin低表达对人红白血病细胞系K562红系分化和细胞活力的影响.方法 通过短发卡RNA(shRNA)干扰技术,构建pirin低表达细胞稳定株,用Western blot方法对干扰效果进行检测,并用联苯胺染色和MTT法分别检测下扰pirin后对K562细胞的红系分化和增殖的影响.结果 转染了pirin-shRNA的细胞其pirin的表达量明显低于对照组(随机干扰组),pirin低表达与对照组相比对细胞增殖无影响,但在诱导剂诱导分化过程中,血红蛋白的合成出现了显著性的降低(P＜0.05).结论 Pirin低表达不影响K562细胞的增殖能力,但能降低其红系分化能力.

摘要:

目的 原核表达、纯化PBDC1蛋白,制备PBDC1多克隆抗体.方法 将PBDC1基因克隆到pET-28a(+)质粒中,构建成重组质粒pET-28a(+)-PBDCI.将此重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)后,IPTG诱导其在宿主菌中大量表达,并进行SDS-PAGE检测.经镍离子亲和柱纯化得到PBDC1融合蛋白,并以此免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.结果 经质谱鉴定,获得了高纯度的PBDC1蛋白.经Western blot验证,获得了抗PBDC1蛋白的多克隆抗体.结论 成功获得抗PBDC1蛋白的多克隆抗体,为研究PBDC1在红系分化中的功能提供了有利工具.

摘要:

目的 探究eIF4H低表达对MEL细胞增殖和红系分化的影响.方法 重组质粒载体eIF4H-shRNA-1或eIF4H-shRNA-2与pCMV-VSVG和pCMV-dR8.2共同转染HEK293T细胞,获得可使eIF4H低表达的慢病毒.慢病毒侵染MEL细胞,获得eIF4H低表达的MEL细胞稳定株,Western blot检测干扰效果.MTT检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;联苯胺染色观察红系分化情况.结果 与对照组相比较,eIF4H-shRNA-2组细胞eIF4H表达明显下调,细胞增殖能力明显减弱(P＜0.01),G1期细胞比例明显增加;经丁酸钠处理后eIF4H-shRNA-2组联苯胺阳性细胞明显增加(P＜0.01).结论 成功构建eIF4H低表达MEL稳定株;eIF4H低表达抑制MEL细胞增殖能力;eIF4H低表达不能诱导MEL细胞红系分化,但可促进丁酸钠诱导MEL细胞红系分化.