摘要:

毛细管电泳-质谱(CE-MS)联用技术具有高灵敏度、高分析效率、低样品损耗等优点,在强极性和带电荷的物质分析中具有明显优势,已广泛应用于生命科学、医学、药学等多个领域.在过去的十几年,影响其应用的主要因素包括系统的稳定性、实验的可重复性、数据的准确性等.为解决现有问题,进一步拓展其应用,研究人员在技术设计和改进等方面做了大量工作.医学和分析化学领域的相关研究证明了CE-MS在代谢组学和蛋白质组学中的实用性.这篇文章综述了2015年以来,CE-MS在技术和应用方面的最新进展,为未来的技术发展及应用提供借鉴.为提高CE-MS的分析效率和数据可比性,该文对多个方面的研究进行了讨论,包括涂层与样品的相互作用、接口技术、运行参数和数据处理方法.文中关于复杂样品(组织、细胞、体液等)代谢组学/蛋白质组学的综述研究,使癌症病理分析、药物开发和疾病监测等分析数据更加可视化,为CE-MS临床分析应用提供借鉴.除了对CE-MS的最新发展进行综合评述外,还提出未来应加强3个方面的研究:(i)从样品前处理和分离技术方面优化分析方法;(ii)从毛细管涂层和接口技术方面调整分析技术;(iii)从临床研究和数据分析方面开发新思路.

摘要:

前列腺癌是男性常见的恶性肿瘤之一,PTEN缺失普遍存在于前列腺癌中,并诱导肿瘤细胞代谢重编程.PTEN缺失诱导的代谢重编程可能为肿瘤靶向治疗提供信息.本实验基于毛细管电泳-质谱联用技术(CE-MS)对PTEN缺失后前列腺癌细胞DU145及正常前列腺细胞RWPE1代谢变化进行系统性分析.在DU145和RWPE1两种细胞中分别检测到200和214种代谢物,相比对照细胞,PTEN敲除后分别含有28和37种差异代谢物.两种细胞敲除PTEN后,均出现苏糖酸升高,异丁基肉碱、二磷酸腺苷、N-羟乙酰神经氨酸、天冬氨酸、亚牛磺酸下降.DU145敲除PTEN后,特异的代谢变化为L-2-羟戊二酸、甘磷酸胆碱、维生素B1、还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽,且都显著升高,这些代谢物或比值的升高能促进肿瘤细胞的增殖、侵袭及抗化疗.同时,发现肌酸酐、肌肽、乙酰神经氨酸等已报道与癌症诊断、预后相关的标志物受PTEN调控.通过对两种细胞差异代谢物比较,鉴定了PTEN诱导的代谢变化及PTEN与其它肿瘤相关基因共同诱导的代谢变化,为PTEN对代谢通路的调控分子机制研究提供信息.

摘要:

建立了毛细管电泳-质谱联用法同时测定酒石酸、丙二酸、苹果酸、乳酸、琥珀酸、戊二酸和谷氨酸的方法.研究了电泳条件和质谱条件对有机酸分离的影响.以50.0 mmol/L醋酸铵(用1.0 mol/L醋酸调至pH4.5)为缓冲溶液,30%异丙醇(含1.0 mmol/L氨水)作为鞘液,以保留时间和质荷比对分离出的组分予以定性确证,用峰面积进行定量.结果表明,酒石酸、丙二酸、苹果酸、乳酸、琥珀酸、戊二酸和谷氨酸的线性范围分别为1.0～100.0,4.0～200.0,1.0～100.0,4.0～200.0,2.0～160.0,1.0～80.0和1.0～80.0 mg/L;相对偏差均小于8.5%;检出限分别为0.3,1.0,0.3,1.0,0.5,0.3,0.3 mg/L.该法用于糖蜜酒精废液中有机酸的测定,结果令人满意.

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杜仲作为一种传统的中药材,其药用成分主要为次级代谢产物绿原酸,是很多种中草药的重要活性成分,广泛存在于杜仲叶片和忍冬科植物的干燥花蕾或初开的花朵中.本研究提供了一种高效准确的从植物样本中检测绿原酸的方法.该方法使用萘乙酸作为内标物提高定量的精确性,减少系统误差,并通过毛细管电泳联用质谱定性提高检测的灵敏度.毛细管电泳联用质谱仪建立萘乙酸标准品与绿原酸标准品的标准曲线,其中萘乙酸与绿原酸的标准曲线相关性系数分别为0.9994和0.9991,均大于0.9990,说明仪器方法及毛细管电泳参数与质谱参数可靠.绿原酸标准品分别以杜仲与金银花植物粉末作为基质,其添加回收率分别为93.61%和97.43%,说明提取方法的提取效率较高.为验证方法的适用性,运用本方法检测分析得出杜仲植物粉末中绿原酸含量为0.92%,金银花植物粉末中绿原酸含量为1.31%.

摘要:

采用毛细管电泳技术研究了重组促红细胞生长素(rhEPO)的分离问题.用N,N-二甲基六烷基溴化铵(6,6-ionene)涂层的毛细管测定了rhEPO中唾液酸的微多相性,同时采用毛细管电泳-质谱(CE-MS)联用技术在22 min内鉴定了rhEPO 20段胰酶消化肽中的11段.该方法简单快捷,重现性好,可用于蛋白质一级结构的测定.

摘要:

毛细管电泳-质谱(CE-MS)联用技术综合了CE的高效分离能力、广泛的样品适应性和MS的高灵敏度、可提供结构信息等优势,已发展成为一种重要的分离分析手段.本文对近几年来CE-MS联用接口技术的发展作一简单介绍,并对CE-MS在生命分析、食品药品分析等领域的一些应用进展予以综述.

摘要:

为监测畜产品中克伦特罗和沙丁胺醇残留,建立了一种适于猪肝等生物组织样品的毛细管电泳-质谱联用分析方法.优化了克伦特罗和沙丁胺醇两种β-激动素的毛细管电泳分离和质谱检测的条件.样品经预处理后,用毛细管电泳-质谱联用分离分析,电泳分离时间小于6 min;在最佳实验条件下,克伦特罗和沙丁胺醇的检出限分别为0.4和0.3μg/kg.方法灵敏度高、特异性强,测定结果准确可靠,可用于畜产品中克伦特罗和沙丁胺醇残留的确证性检测.

摘要:

以作者多年从事毛细管电泳、毛细管电泳-质谱联用及其指纹图谱对中药的研究成果为基础,介绍了毛细管电泳实验条件的优化方法、毛细管电泳指纹图谱的研究方法与评价方法及其在中药质量控制中的作用.