摘要:

目的:改进噬菌体肽库的筛选条件,提高筛选阳性率及阳性克隆重复性.使血管内皮细胞生长因子受体Flt-1拮抗剂的筛选更为有效.方法:通过对血管内皮细胞生长因子受体Flt-1的原核表达产物的变性复性处理,获得相对纯化的可溶性Flt-1受体.将该可溶性受体固相化,对噬菌体表达12肽库进行4 ～ 5轮Bio-panning后,挑取单个噬菌斑制备高滴度噬菌体上清.用ELISA法初步鉴定各噬菌体克隆与sFlt-1的特异性结合并测定阳性克隆的DN A 顺序.在Bio-panning过程中增加非特异性蛋白的预吸附,并减少输入噬菌体数量, 再次筛选短肽库.结果:经过第一次筛选,获得了一系列具有一定重复性与同源性的噬菌体克隆. 改进筛选条件后,筛选阳性率由2%提高到8.3%,阳性克隆的重复性也得到显著提高.该高重复阳性克隆的氨基酸顺序与前一次筛选获得的阳性克隆有较高同源性.结论:Bio-panning 条件的改进提高了筛选效率,为不纯蛋白筛选短肽库积累了经验,并为血管内皮细胞生长因子受体拮抗剂的研制奠定了基础.

摘要:

目的探讨VEGF及其受体flk-1在肝内胆管癌发生中的作用.方法本研究在利用雄性叙利亚地鼠ICC动物模型的基础上,应用免疫组织化学方法检测了ICC形成过程中血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体flk-1在不同病变组织中的表达情况.结果①利用亚硝酸钠、氨基比林成功诱导出了ICC动物模型.②正常肝内胆管细胞中未见VEGF及其受体flk-1表达,VEGF在增生中弱表达或不表达,高表达出现在胆管腺瘤、不典型增生,肿瘤组织过分表达.flk-1在增生组织中不表达,在胆管腺瘤、不典型增生、肿瘤组织中存在flk-1的表达,在癌变过程中,flk-1的表达随着VEGF的增高而增高.结论 VEGF与受体flk-1构成自分泌环与肝内胆管细胞的增殖、恶性转化密切相关,是叙利亚地鼠ICC的形成过程中的早期事件.

摘要:

血管生长是肿瘤发生的关键步骤.通过抑制肿瘤血管生成来阻止肿瘤发展和转移合乎逻辑.该观点于1971年经Folkman梳理,加之随后血管生长因子被发现,这个问题受到学术界极大重视,相关药物研究也随之蓬勃发展.当前已有几种靶向抗血管生长的抗肿瘤药物通过美国食品药品管理局批准,另有几十种该类药物正进行Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期临床试验.但几年来的临床实践却不尽如人意,这提示当前对癌细胞分子生物学的了解还很不够.但抗血管生长作用的提出,以及随后发现的问题,对今后癌症治疗学具有深远影响.该文简要论述肿瘤血管生长的基本原理,并择要分析存在的几个问题.

摘要:

目的：测定血管内皮生长因子（VEGF）和血管内皮细胞生长因子受体（VEGFR）在非小细胞肺癌伴恶性胸腔积液中表达情况，分析VEGF和VEGFR与恶性胸腔积液的关系。方法采用免疫组织化学法检测12例伴有恶性胸腔积液的胸膜转移癌组织和18例不伴有胸腔积液的癌组织中VEGF和VEGFR的表达情况，分析和探讨VEGF和VEGFR与恶性胸腔积液的关系。结果恶性胸腔积液组中VEGF和VEGFR的表达明显高于不伴恶性胸腔积液组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论非小细胞肺癌恶性胸腔积液与VEGF和VEGFR的高表达密切相关。

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目的：研究三七总皂苷（PNS）对急性脑梗死（ACI）患者血清血管内皮生长因子（VEGF）和VEGF受体（VEGFR）的含量影响。方法：选择60例脑梗死患者分为治疗组和对照组各30例，并设立健康组60例，治疗组和对照组均给予脑梗死治疗，治疗组还给予PNS。采用ELISA法测定VEGF和VEGFR于入院时和治疗第14天血清含量的变化，治疗前及治疗后14 d进行神经功能评分。结果：治疗后14 d，治疗组的VEGF、VEGFR水平高于对照组（<0.05）；治疗组的神经功能评分与对照组比较差异有统计学意义（<0.05）。结论：PNS能提高ACI患者的VEGF和VEGFR表达水平，且能改善神经功能缺损。

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摘要:

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR)在糖尿病大鼠肾组织中的表达及其意义.方法将Wistar雌性大鼠随机分为正常对照组(NC组)和糖尿病模型组(DM组)各16只,于成模后第2、4周各处死8只,采用特异性抗体和免疫组化染色方法,对每例大鼠肾组织中VEGF和VEGFR表达的分布范围及强度变化进行观察,并结合生化指标及肾脏病理进行了分析.结果糖尿病大鼠肾组织中VEGF及VEGFR表达的分布范围及强度与正常对照组比较,第2周组有升高趋势,第4周组升高呈显著性差异(P<0.01),尿白蛋白排泄率(UAER)亦显著升高(P<0.01),且肾组织中呈现肾小球内皮细胞增生、典型的结节样变等病理改变.结论肾局部VEGF及VEGFR表达的增加参与了糖尿病肾病(DN)的发生.

摘要:

目的婴幼儿血管瘤的发病机制尚不清楚,目前已知血管内皮细胞生长因子(VEGF)与血管内皮细胞增殖有密切关系.本文探讨VEGF在血管瘤发生发展中的作用.方法采用免疫组织化学方法,对临床收集的90例手术切除的新鲜血管病变标本(血管瘤56例,血管畸形34例,其中增生期血管瘤32例,消退期血管瘤24例),进行VEGF及其受体(VEGFR/KDR)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平的检测.结果VEGF,VEGFR和PCNA表达水平在增生期血管瘤明显升高,与消退期血管瘤、血管畸形和正常皮肤比较差异有显著性(P＜0.01).而消退期血管瘤、正常皮肤及血管畸形的VEGF,VEGFR和PCNA表达差异无显著性(P＞0.01).结论VEGF和VEGFR可能促进血管瘤的生长,增生期血管瘤血管内皮细胞增生活跃.VEGF,VEGFR和PCNA的检测有利于临床鉴别诊断血管瘤及血管畸形,并对血管瘤进行分期.

摘要:

摘要:

用RT-PCR法从人胎儿脐静脉内皮细胞中克隆人 VEGF受体II基因3区,将其重组到pA YZ表达载体中,构建成人VEGF受体II基因3区表达载体.将该载体转化大肠杆菌16C9,获得稳 定表达,表达产物以可溶性状态存在;SDS-PAGE和Western blot分析显示,其分子量约为1 4kD.以纯化的表达产物免疫Balb/c小鼠,眼球采血制备抗血清,抗血清效价在103以上 ,并具有抑制VEGF诱导内皮细胞增殖的作用,在抑制肿瘤血管新生中具有潜在的应用前景.