摘要:

miR-146a在一些癌症生理学过程如肺癌、肝癌、黑色素瘤中具有重要的调节作用.为了揭示miR-146a在羊驼黑色素细胞中的生物学功能,利用RNA-Seq的高通量测序技术从基因组转录水平解析miR-146a可能的分子作用机制,经Illumina sequencing平台测序并进行生物信息学分析.结果表明,miR-146a转染组和对照组羊驼黑色素细胞的转录表达谱,各样品纯数据均达到6.34 Gb,Q30碱基百分比在87.44％以上;组装后共获得161666条序列,其中长度在1 kb的序列有20019条.对序列进行功能注释,包括与NR、Swiss-Prot、KEGG、COG、KOG、GO和Pfam数据库的比对,结果显示,共获得25867条序列的注释结果,其中,SSR分析共获得10963个SSR标记.功能分析结果表明,这些表达基因涉及多种GO分类及KEGG通路且与黑色素相关的GO分类和KEGG通路占有较大比例.结果显示,研究miR-146a在黑色素细胞中的功能及其分子机制,并获得了黑素细胞转录组图谱,可为进一步研究控制羊驼毛色生理和色素生成的基因表达网络提供宝贵的资源.

摘要:

目的:探究强直性脊柱炎血清miR-146a表达情况,从而发现潜在的强直性脊柱炎的生物标记分子.方法:qRT-PCR检测强直性脊柱炎患者和正常人血清miR-146a表达水平.根据脊柱后凸的程度将患者分为A(后凸畸形＜70％)和B(后凸畸形≥70％)两组.疾病的活性以及患者功能状态分别由强直性脊椎炎疾病活动度指数(BASDAI)和强直性脊椎炎功能指数(BASFI)来表示.采用qRT-PCR检测A和B两组血清miR-146a表达水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价血清中miR-146a对强直性脊柱炎的诊断价值,同时将miR-146a表达量与临床指标进行相关性分析.结果:miR-146a在强直性脊柱炎血清组表达明显上调(P＜0.05).miR-146a的ROC曲线下面积值为0.917;且B组强直性脊柱炎患者血清中miR-146a表达水平显著高于A组(P＜0.05).此外,miR-146a表达水平同BASDAI之间存在显著相关性(r=0.5,P＜0.05).结论:血清中miR-146a表达检测可作为强直性脊柱炎诊断的辅助性生物标记.miR-146a表达水平也可能与疾病活性和胸腰椎后凸畸形的严重程度成一定的相关性.

摘要:

目的 探讨银屑病患者血清微小RNA-146a(miR-146a)和微小RNA-125b(miR-125b)水平检测及临床意义.方法 选取2017年6月至2018年6月门诊和住院寻常型银屑病患者72例作为银屑病组,同时选择同期进行健康体检者70例作为对照组,采用miR微阵列分析银屑病相关miR的表达,用实时荧光RT-PCR(RTFQ-PCR)法检测研究对象血清中miR-146a和miR-125b的水平,并与银屑病皮损面积和严重程度评分法(PASI)进行相关分析.结果 对8个样本进行miR微阵列分析(银屑病组和对照组各4个),银屑病患者中发现39个miR表达水平显著不同,其中26个miR表达上调,13个表达下调;与对照组比较,银屑病组血清中miR-146a相对表达量增高,miR-125b?mRNA相对表达量降低(P<0.05),与微阵列数据一致;与进行期比较,静止期和退行期患者血清中miR-146a?mRNA相对表达量降低,miR-125b?mRNA相对表达量增高,且随着银屑病病情的好转,miR-146a下调和miR-125b上调幅度更显著,差异均具有统计学意义(P<0.05);银屑病患者PASI评分与血清中miR-146a?mRNA的表达水平呈正相关,与miR-125b的表达水平呈负相关(r=0.510、-0.417,P=0.026、0.038).结论 银屑病血清中miR-146a水平升高、miR-125b水平降低,且与银屑病的严重程度和PASI相关,检测miR-146a和miR-125b水平有助于判断其病情严重程度及疗效评估.

摘要:

目的:比较女性类风湿关节炎(RA)患者miR-146a、miR-23b的表达水平与健康者的差异,分析miRNAs与炎症因子IL-17及实验室指标的相关性,以明确miR-146a、miR-23b是否与RA相关;分析雌激素对miR-146a、miR-23b及IL-17表达的影响,以明确雌激素影响RA的可能机制.方法:实时荧光定量PCR检测27例女性RA患者及27名女性健康体检者PBMCs中miR-146a、miR-23b的表达水平,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血浆IL-17的浓度,统计分析RA患者miR-146a、miR-23b及IL-17的表达水平与健康者的差异;收集RA患者临床实验室指标ESR、CRP、抗CCP抗体、RF的检测结果,计算DAS28评分,分析miR-146a、miR-23b分别与血浆IL-17、ESR、CRP、抗CCP抗体、RF及DAS28的相关性.再用雌二醇处理RA组和对照组的PBMCs后同样检测miR-146a、miR-23b及培养上清IL-17的水平,分析雌激素处理前后其水平变化.结果:女性RA患者PBMCs中miR-146a、miR-23b显著高于健康对照(P<0.05),miR-146a、miR-23b的表达水平分别与血浆IL-17、ESR、血清CRP、抗CCP抗体、RF、DAS28之间均无显著相关性(P>0.05).经雌二醇处理后,女性RA患者PBMCs中miR-146a、miR-23b无显著变化(P>0.05),培养上清IL-17浓度显著增高(P<0.05),健康体检者PBMCs中miR-146a的表达水平明显下调(P<0.05),miR-23b的表达水平无明显变化(P>0.05).结论:女性RA患者PBMCs中miR-146a、miR-23b的表达水平显著上调.雌激素可能一方面通过增强IL-17的表达参与RA的病程,另一方面通过下调PBMCs中miR-146a的表达阻止健康人向RA发展.

摘要:

目的 探讨miR-146a在脊髓损伤炎症反应中作用机制.方法 脊髓损伤大鼠模型静脉注射miR-146a抑制剂/激动剂,并检测IRAK1和TRAF6及下游炎症因子表达,利用萤光素酶实验验证miR-146a是否直接作用于IRAK1和TRAF6基因.结果 阴性对照组miR-146a表达在脊髓损伤后明显上调(P＜0.01).大鼠IRAK1和TRAF6基因及下游炎症因子表达在静脉注射miR-146a抑制剂后显著增加(P＜0.01),而在注射miR-146a激动剂后显著减少(P＜0.01).miR-146a明显抑制含有IRAK1和TRAF6基因3'UTR区荧光素酶载体表达(P＜0.01).结论 miR-146a可靶向下调IRAK1和TRAF6基因表达,在脊髓损伤恢复过程中发挥积极作用.

摘要:

目的 研究急性冠脉综合征(ACS)患者外周血单个核细胞内MicroRNA-146a (miR-146a)基因的表达,并探讨炎症因子及其表达水平的相关性.方法 分离26例急性心肌梗死(AMI)、25例不稳定型心绞痛(UA)、22例稳定型心绞痛(SA)、18例胸痛综合征(CPS)患者外周血单个核细胞(PBMC),采用Real-time PCR法及Northern blot法检测各组患者PBMC中miR-146a的表达水平,同时,将分离的PBMC在体外经植物血凝素(PHA)刺激培养后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养基上清中促炎因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)及抗炎因子白介素(IL-10)的表达水平,并对miR-146a与炎症因子的表达进行相关性研究.结果 AMI组和UA组患者miR-146a基因表达明显高于SA组与CPS组(P<0.05),而SA组和CPS组间差异无统计学意义(P>0.05).ELISA结果 显示,AMI组及UA组培养基上清中TNF-α、IFN-γ明显高于SA组及CPS组(P<0.01),而IL-10表达明显并无显著变化(P>0.05).相关性研究发现,miR-146a 的表达与TNF-α、IFN-γ浓度呈显著正相关(P<0.05).结论 ACS患者miR-146a表达明显增加,并与促炎因子表达呈正相关,提示miR-146a功能亢进可能参与了ACS炎症反应过程,可能是动脉粥样硬化不稳定斑块的发病机制之一.

摘要:

目的 分析癫痫病人miR-146a、miR-124、白介素-1(IL-1)、双皮质素(Dcx)表达水平及临床意义.方法 选取2017年5月—2018年5月我院收治的癫痫病人90例,其中单纯部分性发作19例,复杂部分性发作28例,全身强直阵挛性发作43例;单次发作36例,频繁发作54例;癫痫轻度18例,中度29例,重度43例.另选取同期在我院进行健康体检者90名作为正常组.采用酶联免疫吸附法测定IL-1水平,采用聚合酶链式反应(PCR)检测miR-146a、miR-124、Dcx水平.结果 与正常组比较,癫痫组miR-146a、miR-124、IL-1、Dcx相对表达量升高(P<0.05).与单纯部分性发作比较,复杂部分性发作、全身强直阵挛性发作癫痫病人miR-146a、miR-124、IL-1、Dcx水平升高(P<0.05);与复杂部分性发作比较,全身强直阵挛性发作癫痫病人miR-146a、miR-124、IL-1、Dcx水平升高(P<0.05).与单次发作比较,频繁发作癫痫病人miR-146a、miR-124、IL-1、Dcx水平表达升高(P<0.05).与轻度比较,中度、重度癫痫病人miR-146a、miR-124、IL-1、Dcx水平升高(P<0.05);与中度比较,重度癫痫病人miR-146a、miR-124、IL-1、Dcx水平升高(P<0.05).结论 癫痫病人miR-146a、miR-124、IL-1、Dcx呈高表达,其表达水平与发作频繁、发作类型、发作程度相关,miR-146a、miR-124、IL-1、Dcx在癫痫病人中发挥重要作用.

摘要:

目的 探讨循环miR-146a水平对亚临床甲状腺功能减退症病人冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)的预测价值.方法 选择2015年1月-2018年1月在我院就诊的246例亚临床甲状腺功能减退症病人作为研究对象,以冠脉造影为金标准,观察病人一般情况、实验室检查指标与冠心病发病的相关性.结果 246例病人检出冠心痛102例,检出率为41.46％,冠心病组miR-146a表达量为2.209±0.636,非冠心病组miR-146a表达量为1.586±0.586,差异有统计学意义(f=7.925,P＜0.001).单因素分析显示,饮酒不是亚临床甲状腺功能减退症病人冠心痛发病的危险因素(P＞0.05),性别、年龄、体重指数、冠心病家族史、吸烟、高血压、糖尿病、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、血清同型半胱氨酸(Hcy)、血清促甲状腺激素(TSH)是影响亚临床甲状腺减退症病人冠心病发病的危险因素(P＜0.05).多因素Logistic分析结果显示,年龄≥60岁、糖尿病、LDL-C≥3.12 mmol/L、血清促甲状腺激素(TSH)≥10 mlU/L、miR-146a是影响亚临床甲状腺功能减退症病人冠心病发病的独立危险因素(P＜0.05).ROC显示,miR-146a预测冠心病的灵敏度、特异性、Cut-off、AUC和95％ CI分别是62.75％、82.64％、2.06、0.767和0.709～0.818.结论 miRNA-146a是亚临床甲状腺功能减退症病人冠心病发病的独立危险因素,血浆miR-146a水平对亚临床甲状腺功能减退病人冠心病具有一定的预测价值.

摘要:

目的 探讨急性心肌梗死病人外周血单个核细胞中miR-146a表达以及与短期预后的关系.方法 选取2015年2月—2016年8月在河南焦作市人民医院心内科治疗的急性心肌梗死病人155例作为病例组,选取同期健康者60名作为对照组,收集研究对象的临床资料,利用实时荧光定量PCR技术检测单个核细胞中miR-146a表达,所有病人顺利出院,且均进行门诊或电话随访12个月,根据主要不良心血管事件(MACE)发生情况分为MACE组(46例)和非MACE组(109例).结果 病例组外周血单个核细胞中miR-146a相对表达量高于对照组(P<0.05);外周血单个核细胞中miR-146a相对表达量在诊断急性心肌梗死时,曲线下面积0.964(95％CI 0.942～0.986),当miR-146a相对表达量取界值1.65时,灵敏度91.6％,特异度91.7％.MACE组病人miR-146a表达量、心肌肌钙蛋白I(cTnI)和B型钠尿肽(BNP)高于非MACE组(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,cTnI、BNP和miR-146a表达量是影响急性心肌梗死病人预后的独立危险因素(P<0.05);外周血单个核细胞中miR-146a相对表达量在评估病人预后时,曲线下面积0.873(95％CI 0.800～0.946),当miR-146a相对表达量取界值1.83时,灵敏度76.1％,特异度90.8％.结论 急性心肌梗死病人外周血单个核细胞中miR-146a呈高表达,且与病人不良预后有关,有望成为急性心肌梗死病人诊断及预后评估的潜在标志物.

摘要:

目的：探讨miR－146a遗传变异（rs2910164）与胃癌临床病理特征及预后的关系。方法选择98例接受奥沙利铂联合氟尿嘧啶类药物术后辅助化疗的Ⅰ～Ⅲ期胃癌患者，分析rs2910164遗传变异与患者临床病理特征及生存的相关性。结果全组患者2年无病生存率为63％，3年总生存率为73.4％。 GC＋CC基因型患者淋巴结转移发生率低于GG基因型，但差异无统计学意义（P＝0.059）。有或无淋巴结转移的患者3年总生存率分别为89.3％和63.7％（P＝0.015），Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者3年总生存率分别为100.0％、88.6％和56.9％（P＝0.018）。脉管瘤栓（P＝0.092）、神经受侵（P＝0.071）与OS无明显相关性。 GC＋CC基因型患者的3年总生存率显著高于GG基因型，分别为75.1％和66.7％（ P＝0.041）。预后多因素分析显示，分化程度（ P＝0.033，RR＝5.116，95％CI 1.145～22.865）和淋巴结状态（ P＝0.031，RR＝6.648，95％CI 1.191～37.118）为总生存的独立影响因素。结论 miR－146a遗传变异可能与胃癌患者淋巴结转移状态及预后相关。