PCR快速克隆猴免疫缺陷病毒核心蛋白基因

• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: SIV PCR 巢式PCR 序列分析
• 年，卷（期）: 1998,（5）
• 页码范围: 30-33
• 页数: 4页
• 分类号: Q785
• 语种: 中文

摘要

SIV为猴艾滋病的病原,其核心蛋白基因保守性强,它编码的27KD蛋白是病毒颗粒的主要结构蛋白,可做为SIV感染的主要诊断依据.我们根据SIV基因序列,设计合成了一对含有两个合适酶切位点的特异性PCR引物;PCR法直接从SIVMAC毒株感染的恒河猴外周血淋巴细胞基因组DNA中扩增分离SIV病毒核.心蛋白编码区段,扩增产物经纯化和ECORI、SALL双酶切后与相同酶切位点的质粒载体PBV220连接,转化大肠杆菌DH52,经巢式PCR快速筛选,获得了SIV核心蛋白基因重组质粒PBVSG;核苷酸序列测定发现了7处碱基点突变,作者分析这是由于SIVMAC毒株在中国恒河猴体内感染适应后发生基因突变所致.