抗人纤维蛋白单链抗体重链可变区的人源化

• 作者: 宋增璇 李彬 李文平 蔡英林 许复华 许静
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 单链抗体 免疫原性 人源化
• 年，卷（期）: 1999,（3）
• 所属期刊栏目: 基因工程抗体
• 页码范围: 246-249
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.1999.03.031

摘要

目的 人源化抗人纤维蛋白单链抗体的重链,降低人抗鼠抗体反应. 方法 从基因文库中挑选到与鼠源抗人纤维蛋白单链抗体重链(VH-8E5)同源性71.8%的人源免疫球蛋白HUMHCH109重链(VH )序列,作为人源化改造VH-8E5的框架.人工合成人源化VH-8E5片段,用连接酶连接成完整的人源化VH-8E5,构建表达载体pOPE101-VH-8E5.转化JM109后用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达. 结果 经聚丙烯酰胺电泳和ELISA证明表达产物相对分子质量30×103左右,有特异性识别和结合人纤维蛋白能力,是亲本抗体ScFv-8E5活性的4/5左右.人源化ScFv-8E5表达产量为转化菌总蛋白的11.2% . 结论 人源化VH-8E5仍具有特异性识别人纤维蛋白的活性,ScFv-8E5重链的人源化基本获得成功.