抗红斑丹毒丝菌的rSpaA蛋白猪源单链抗体库构建及单链抗体淘选

• 作者: 余兴龙 方超 李润成 柴强强 王锐 葛猛 陈一苇
• 来源期刊: 湖南农业大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 猪源抗体库 单链抗体 红斑丹毒丝菌 噬菌体展示技术
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧?兽医?水产
• 页码范围: 647-653
• 页数: 7页
• 分类号: S858.28
• 字数: 5543字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13331/j.cnki.jhau.2016.06.012

摘要

从免疫过rSpaA的猪的脾淋巴细胞中提取总RNA，采用RT–PCR技术反转录合成cDNA。设计兼并引物扩增抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因片段，采用重叠延伸PCR方法，将VH和VL通过Linker连接成重组单链抗体(以下简写为 scFv)的基因片段。将 scFv 的基因连接至噬菌粒载体 pComb3Xss，将重组载体电转化至宿主菌XL1-Blue，并经辅助噬菌体M13KO7拯救，获得猪源噬菌体单链抗体库，库容约为2.5×106。以rSpaA为靶抗原，经免疫亲和筛选，获得8株特异性较好的阳性克隆。本研究结果可为制备抗红斑丹毒丝菌的重组scFv提供新途径，并为猪丹毒的免疫检测和综合防制提供材料基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余兴龙	湖南农业大学动物医学院	102	335	8.0	14.0
2	李润成	湖南农业大学动物医学院	116	254	7.0	12.0
3	王锐	湖南农业大学动物医学院	3	4	1.0	2.0
4	方超	湖南农业大学动物医学院	10	16	3.0	3.0
5	柴强强	湖南农业大学动物医学院	6	9	2.0	3.0
6	葛猛	湖南农业大学动物医学院	20	27	3.0	4.0
7	陈一苇	湖南农业大学动物医学院	1	1	1.0	1.0