汉坦病毒陈株S基因编码区的克隆、序列分析及表达

• 作者: 吴兴安 尹文 张芳琳 徐志凯 白文涛 薛小平 赵茜 闫岩 马文煜
• 来源期刊: 中国病毒学
• 学科: 生物学
• 关键词: 汉坦病毒 S基因 核苷酸序列分析 基因表达
• 年，卷（期）: 1999,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 48-52
• 页数: 5页
• 分类号: Q93
• 字数: 3129字
• 语种: 英文

摘要

从汉坦病毒陈株感染的Vero-E6细胞裂解液中提取病毒RNA,经逆转录PCR获得病毒S基因编码区约1.3kb cDNA片段,克隆该片段后进行核苷酸序列测定,并与汉坦病毒76-118株进行同源性比较,结果二者核苷酸序列同源性为86%,推导的氨基酸序列同源性为97%.将该基因片段插入原核表达载体pGEX-4T-1,在大肠杆菌中获得高效表达.表达产物为GST-NP融合蛋白.SDS-PAGE检测表达蛋白分子约72kD左右.Western blotting和ELISA试验结果表明,表达产物可与多株抗汉坦病毒核蛋白的McAb发生反应,其抗原表位及McAb反应谱与76-118株相比存在某些差异.