抗人TNF-α单抗基因的克隆及鉴定

• 作者: 王卓智 王欲晓 王琰 骆训懿
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人TNF-α 基因 抗体,单克隆
• 年，卷（期）: 1999,（2）
• 所属期刊栏目: 基因工程抗体
• 页码范围: 166-168
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.1999.02.032

摘要

目的 克隆抗人TNF-α鼠单抗得可变区基因以构建人-鼠嵌合抗体表达载体.方法 采用RT-PCR技术,以前导肽序列的引物从1个分泌抗人TNF-α的鼠单抗杂交瘤细胞系中克隆抗体轻链、重链可变区基因(Vκ, VH),在大肠杆菌中表达Fab段核实其功能活性.结果 分别得到了2个Vκ和2个VH基因.DNA序列测定表明,其中1个轻链可变区基因为骨髓瘤细胞系中固有的无功能基因.1个重链可变区基因经原核系统表达测活表明无抗体活性.另一个轻链和重链可变区基因的成熟蛋白编码部分与从第一骨架区引物所克隆的、可在大肠杆菌表达出抗体活性的Vκ、VH序列相符.将该轻链、重链基因分别克隆到了人-鼠嵌合轻链、重链表达载体中.结论 通过原核表达系统核实,获得了抗TNF-α单抗的可变区基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王卓智		1	4	1.0	1.0