卡介苗中具启动子活性片段克隆及分析

• 来源期刊: 四川大学学报(自然科学版)
• 关键词: 卡介苗 启动子活性片段 克隆
• 年，卷（期）: 1999,（2）
• 页码范围: 161-166
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

利用启动子探针型质粒PKK232－8从卡介苗染色体DAN的BAMHI酶切片段中克隆到4个具启动功能的DNA片段,测定各重组子对氯霉素(CM)的抗性,其中含3.3KB外源片段的重组质粒PBCG2大肠杆菌转化子在LM培养基上对CM抗性可达170*10－6G/ML,作了该片段的限制性酶切图谱.对PBCG2利用SALⅠ位点,亚克隆出4种部分重叠的具启动功能的DNA片段,这4种重组质粒分别命名为PBCG2－1,PBCG2－2,PBCG2－6和PBCG2－8,并分析了其中插入片段的大小及其转化子对CM的抗性.将PBCG2－2的SALⅠ外源片段插入到分枝杆菌启动子探针型穿梭质粒PEQ3,获得一个可在卡介苗中表达LACZ基因的重组子PEB22.斑点杂交实验证明,具有启动功能的DNA片段来源于卡介苗的染色体DNA.结果表明克隆到一个对大肠杆菌和卡介苗均具启动子活性的DNA片段