肝癌凋亡细胞CDNA文库构建及其凋亡相关基因的初步筛选

• 来源期刊: 临床与实验病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝肿瘤 细胞凋亡 CDNA文库 杂交 克隆.分子
• 年，卷（期）: 1999,（6）
• 页码范围: 477-479
• 页数: 3页
• 分类号: R735.7
• 语种: 中文

摘要

目的:通过肝癌凋亡细胞.DNA文库的构建,进而筛选人肝癌细胞凋亡相关基因.方法:用阿霉素诱导人肝癌HCC－9204细胞凋亡,磁珠法提取mRNA,然后将其反转录为cDNA,将合成的cDNA加上EcoR1接头,并与λgt11载体臂连接,构建为表达的cDNA文库.PCR法鉴定插入片断长度,T载体法克隆插入片断.消减杂交和点杂交法相结合筛选.DNA文库.结果:肝癌凋亡细胞CDNA文库容量为1*106pfu/μgDNA,平均片断长度为1~2kb.筛选CDNA文库得到一长度为1.5kb的DNA片段,并已测其部分序列.结论:构建的肝癌凋亡细胞CDNA文库对筛选和鉴定人肝癌细胞凋亡相关基因具有重要作用.筛选的基因可能是人肝癌细胞凋亡调控基因中的一个.