原发型肝癌组织cDNA文库的构建及抗原基因的筛选

• 作者: 傅思源 刘辉 吴孟超 周伟平 尹磊 李爱军 潘泽亚
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 原发型肝癌 cDNA文库 重组cDNA表达文库的血清学分析 抗原基因
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 691-693,698
• 页数: 4页
• 分类号: R735.7
• 字数: 2617字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2008.06.005

摘要

目的 构建人原发型肝癌组织cDNA文库,以SEREX方法从cDNA文库中筛选肝癌抗原基因.方法 采用确诊的原发型肝癌患者新鲜手术切除癌组织构建cDNA文库,测定原始文库滴度,进行蓝白筛选以确定文库的重组率.以肝癌患者的血清,采用血清学方法筛选所构建的cDNA文库,阳性克隆经PCR检测鉴定后进行序列分析.结果 成功构建了混合原发型肝癌cDNA文库经测定原始文库滴度为7.42X106pfu/mL,含3.96×106个重组子,重组率为93%,扩增文库滴度为3.92×109pfu/mL,cDNA插入片段大小在0.5～3.0 kb之间.文库经3轮血清学筛选共获得31个阳性克隆,分别代表了24个独立的cDNA插入片段(抗原基因).其中17个与已知基因高度同源,另外7个基因与GenBank中已知基因的部分同源,其中有3个是新基因.利用SMART技术构建了高质量的人原发型肝癌组织cDNA表达文库,有利于以cDNA文库为基础的进一步的实验研究.结论 应用SEREX技术初步筛选原发型肝癌组织cDNA文库,共得到17个原发型肝癌相关抗原基因,其中有3个是新基因,可能为原发型肝癌的免疫学研究提供新的研究分子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘泽亚		40	331	10.0	16.0
2	吴孟超		466	5098	32.0	53.0
3	周伟平		100	623	12.0	18.0
4	李爱军		43	226	9.0	13.0
5	傅思源		29	205	9.0	12.0
6	刘辉		58	289	10.0	14.0
7	尹磊		10	33	3.0	5.0