小鼠内皮抑素基因克隆、表达及其抑瘤活性鉴定

• 作者: 吴元明 吴景文 屈延 柴玉波 章翔 高大宽
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 内皮抑素 反转录-聚合酶链式反应 基因克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2000,（2）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 87-89
• 页数: 3页
• 分类号: Q784
• 字数: 2189字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2000.02.003

摘要

利用RT-PCR法从小鼠肝组织扩增出Endostatin基因,重组入pUC19质粒.经测序后,将片段重组入大肠杆菌表达载体pDH并用温度诱导表达.将表达的蛋白经纯化及复性后直接注入大鼠C6胶质瘤模型内,检测其对胶质瘤生长的抑制作用.结果,在小鼠肝组织中成功扩增到Endostatin基因,测序与报道序列一致.重组进pDH后经温度诱导表达,在SDS-PAGE电泳上得到一条新的蛋白表达带,分子量为20kD.纯化及复性后的蛋白能明显抑制小鼠体内胶质瘤的生长,为利用Endostatin进行脑胶质瘤基因治疗奠定了实验基础.