t-PA突变体乳腺表达载体的构建及其在乳腺中的瞬时表达

• 作者: 王冬梅 程萱 邓继先 黄秀梨
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: β-乳球蛋白 突变型组织型纤溶酶原激活剂 暂时性表达系统 乳腺
• 年，卷（期）: 2000,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 192-195,199
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 2880字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2000.03.009

摘要

目的:探索建立乳腺瞬时性表达系统,用于快速检测所构建的乳腺表达载体的有效性,为进行转基因动物实验奠定基础.方法:DNA常规操作;孕小鼠乳腺注射;纤维蛋白琼脂糖平板法检测Mut-PA.结果:构建了含有Mut-PA基因的乳腺表达载体pB3mt-PA,将此载体直接注射到孕小鼠乳腺中进行暂时性表达,产仔后第4天采乳汁,用纤维蛋白琼脂糖平板法检测t-PA的活性,表达活性可达20～40 U/ml,其活性能被天然的t-PA多克隆抗体所中和,表达持续期8 d.结论:所克隆的牛BLG基因-705 bp的5′端调控序列包含了必需的调控元件,并具有调控外源基因的表达的功能,克隆的3′端序列是适合的.构建的表达载体可用于制备转基因动物.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王冬梅	军事医学科学院生物工程研究所	9	58	3.0	7.0
2	邓继先	军事医学科学院生物工程研究所	72	564	13.0	19.0
3	程萱	军事医学科学院生物工程研究所	40	314	10.0	16.0
4	黄秀梨	北京师范大学生命科学学院	7	150	5.0	7.0