抗癌胚抗原嵌合重链与核心链霉亲和素基因的融合及表达

• 作者: 吴祥甫 廖文韬 朱承谟 李彪 杨冠珍 杨卫东
• 来源期刊: 生物化学与生物物理学报（英文版）
• 关键词: 癌胚抗原 嵌合重链 链霉亲和素 基因表达
• 年，卷（期）: 2000,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 55-58
• 页数: 4页
• 语种: 英文

摘要

将抗癌胚抗原(CEA)单克隆抗体的重链可变区与人的恒定区(Cγ3)连接,制备抗癌胚抗原嵌合重链用于放免治疗及其他导向治疗,可减少人抗鼠抗体反应(HAMA).为纯化及核素标记抗体,将嵌合重链基因与核心链霉亲和素基因融合.融合基因在大肠杆菌得到高效表达,表达量占菌体总蛋白的24%.SDS-PAGE和蛋白质印迹图谱显示表达产物分子量为70 kD,与其基因编码蛋白质的理论推算值相符.以HRP标记的生物素作为抗体进行蛋白质印迹,在70 kD处可见表达条带,表明融合蛋白能特异性地与生物素结合,使嵌合重链经生物素柱进行廉价纯化成为可能.表达产物在胞内主要以不溶性的包含体存在,经变性和复性处理后,RIA表明表达产物具有结合其特异性抗原CEA的能力.