超抗原VEGF-SEA融合基因的克隆与表达

• 作者: 孙嘉琳 朱宏丽 罗金凤 胡坤 边小鹤
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 血管内皮生长因子类 葡萄球菌属 肠毒素类 超抗原 基因表达 克隆,分子
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 783-785
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2008.10.013

摘要

目的:构建血管内皮生长因子-葡萄球菌肠毒素A(VEGF-SEA)基因的原核表达质粒,获得VEGF-SEA融合蛋白.方法:制备VEGF-SEA基因片段,插入pET40b构建重组质粒pET40b-VEGF-SEA,经序列分析正确后转化大肠杆菌B121(DE3),进行IVTG诱导表达蛋白.用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达蛋白的相对分子质量及表达形式,并对产物采用His?Bind Buffer kit试剂盒纯化.结果:获得VEGF-SEA基因片段长1 130 bp,经序列分析与预期完全一致,其表达出目的蛋白的大小约为66.2 ku,以包涵体形式表达,经纯化,纯度达到90%以上.结论:表达载体pET40b-VEGF-SEA构建成功,VEGF-SEA融合蛋白获得高效表达,本实验为进一步研究VEGF-SEA蛋白的活性及其功能,探讨超抗原抑制肿瘤生长作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱宏丽	天津科技大学生物工程学院	3	1	1.0	1.0
2	孙嘉琳	天津科技大学生物工程学院	12	10	2.0	2.0
3	罗金凤	天津科技大学生物工程学院	3	1	1.0	1.0
4	胡坤	天津科技大学生物工程学院	5	2	1.0	1.0
5	边小鹤	天津科技大学生物工程学院	2	1	1.0	1.0