鸡VEGF基因的克隆及融合蛋白的表达与分离纯化

• 作者: 刘倩 唐亮 谈立松 赵玉军
• 来源期刊: 沈阳农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: cVEGF 融合蛋白 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 447-450
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3161字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1700.2008.04.014

摘要

为获得鸡VEGF基因片段,原核表达GST-cVEG基因,并对融合蛋白进行分离纯化,应用RT-PCR从鸡睾丸中扩增出VEGF片段,将PCR产物克隆至pMD 18-T载体.随后,将cVEGF片段亚克隆至带有GST的原核表达载体pGEX-4T-2中,测序鉴定.将重组质粒pGEX4T2-cVEGF转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,IPTG诱导,并进一步通过Ni-NTA Agarose亲合层析纯化,纯化产物以SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,结果表明,成功地构建了原核表达质粒pGEX4T2-cVEGF.GST-cVEGF融合蛋白在大肠杆菌中得到了表达,Ni-NTA Agarose纯化后得到较纯的蛋白.Western blot分析证实,纯化后蛋白是GST-cVEGF融合蛋白,为进一步研究CST-cVEGF融合蛋白疫苗抗小鼠肿瘤模型奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵玉军	沈阳农业大学畜牧兽医学院	141	677	13.0	20.0
2	唐亮	上海市肺科医院肺癌免疫研究室	23	95	5.0	9.0
3	刘倩	沈阳农业大学畜牧兽医学院	5	21	2.0	4.0
4	谈立松	上海市肺科医院肺癌免疫研究室	18	41	4.0	5.0