PCR-ELISA检测HBV?DNA方法学建立及初步临床应用

• 作者: 张文辉 林向阳 袁谦 陆永绥 陈晓东 陶志华
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 聚合酶链反应 酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2000,（3）
• 所属期刊栏目: 临床免疫学
• 页码范围: 142-144
• 页数: 3页
• 分类号: Q789|R512.62
• 字数: 2023字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-764X.2000.03.012

摘要

建立PCR-ELISA检测HBV DNA的方法学,探讨其最佳实验条件并初步评价其临床应用价值.常规PCR引物用地高辛标记,使扩增产物带有地高辛标记成份,再通过亲合素-生物素系统把生物素标记探针包被在固相聚苯乙烯板小孔中,通过固相探针与HBV DNA扩增产物进行杂交,与碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体反应,经NPP显色,根据其A405 nm值大小,推算样品中HBV DNA模板含量.建立PCR-ELISA的最佳实验条件为PCR循环次数为30次,杂交温度37 ℃,杂交时间1 h,批内变异系数为9.4%,批间变异系数16.9%,在60例乙肝患者血清标本检出率为70%(42/60),而常规凝胶电泳检出率为46.7%(28/60),两者具有显著性差异(χ2=6.67 P<0.01).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶志华	温州医学院附属第一医院检验科	96	602	15.0	20.0
2	陈晓东	温州医学院附属第一医院检验科	70	572	15.0	21.0
3	张文辉	温州医学院附属第一医院检验科	39	247	10.0	14.0
4	林向阳	温州医学院附属第一医院检验科	37	257	9.0	14.0
5	陆永绥	温州医学院附属第一医院检验科	23	133	6.0	11.0
6	袁谦	温州医学院附属第一医院检验科	51	572	13.0	22.0