人转化生长因子基因重组克隆及高效表达

• 作者: 于丽莉 刘军 章有章 赵涵芳
• 来源期刊: 上海医学
• 关键词: TGFβ1 基因工程 基因表达
• 年，卷（期）: 2000,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 84-87
• 页数: 4页
• 分类号: Q81|R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9934.2000.02.008

摘要

目的克隆人转化生长因子(TGFβ 1)基因并且在大肠杆菌中表达.方法从人的血小板中抽提总RNA,经逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)得到全长TGFβ 1 cDNA,将其克隆于表达质粒pBLMVL2中,构建了在PL启动子控制的含有T GFβ 1 cDNA重组子,转化到大肠杆菌RR1菌株中,进行温敏诱导表达.结果表达产物经SDS-PAGE电泳染色后,显示其相对分子质量为12.5×103,计算机灰度扫描分析,表达产物约占全菌蛋白的20%左右,Western-blot分析证实,表达产物为TGFβ 1,细胞实验显示其具有一定的生物活性.结论在大肠杆菌中表达出具有活性的人TGFβ 1.这为我们下一步研究其功能和临床应用打下了基础.