pET3c衍生载体的构建及应用研究

• 作者: 刘杰森 姚汝华 张玲 李志英 林剑 洪岸 熊盛
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: pET载体 多克隆位点 目视法筛选 牛碱性成纤维细胞生长因 子 表达
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 页码范围: 4-7
• 页数: 4页
• 分类号: Q782
• 字数: 2120字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8915.2001.01.002

摘要

对原核表达载体pET3c进行改建，消去载体上非必需的EcoRⅠ、HindⅢ限制酶位点，然后在克隆位点BamHⅠ处引入LacZ片段，经此二步改建后的载体命名为pJN982。该载体保留了pET3c高效表达外源基因的能力，同时，其融合克隆位点由1个增至7个，并获得以目视法筛选重组子的能力。应用该载体在E.coliBL21(DE3)pLysS中融合表达牛碱性成纤维细胞生长因子，表达量占菌体总蛋白30.04%。破碎菌体上清经阳离子交换和肝素亲和两步层析，得纯度为95%的重组蛋白，活性检测显示，重组蛋白具有与参照品一致的促有丝分裂活性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林剑	暨南大学生物工程研究所	49	553	13.0	21.0
2	洪岸	暨南大学生物工程研究所	107	856	14.0	25.0
3	张玲	暨南大学生物工程研究所	21	122	6.0	10.0
4	姚汝华	华南理工大学生物工程系	86	1231	22.0	29.0
5	李志英	暨南大学生物工程研究所	13	69	4.0	8.0
6	熊盛	华南理工大学生物工程系	5	45	4.0	5.0
7	刘杰森	暨南大学生物工程研究所	6	21	3.0	4.0