HSV1-TK转染人肺腺癌细胞A549的实验研究

• 作者: 何祥梁 何雪花 李淑萍 郭先健 钱桂生 陈维中 黄桂君
• 来源期刊: 中国肺癌杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HSV1-TK基因 基因转移 基因治疗 肺肿瘤 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 所属期刊栏目: 肺癌分子生物学
• 页码范围: 25-28
• 页数: 4页
• 分类号: R730.261|R734.2
• 字数: 3071字
• 语种: 中文

摘要

目的体内外观察HSV1-TK／GCV对人肺腺癌细胞A549的杀伤效应。方法构建含TK基因的逆转录病毒表达载体，电穿孔法转化肺癌细胞A549。MTT法检测转染细胞对GCV的药物敏感性，并观察旁观者效应；电镜、FCM、TUNEL法检测GCV诱导转染细胞凋亡变化；PCR和细胞原位杂交分别检测转染细胞TK基因整合和表达；活体内观察GCV对转染细胞、亲代细胞接种裸鼠皮下肿瘤治疗效果。结果转基因细胞变得较不规则，多角型，易形成空泡。A549、A549-PLXSN、A549-TK三种细胞体外倍增时间分别为(36.15±3.27)、(40.82±3.75)和(42.06±4.12)小时(P＞0.05)。转染细胞对GCV的敏感性比亲代细胞提高46倍(P＜0.001)。旁观者效应在高细胞密度接种（1×104细胞／孔）较低细胞密度接种（1×103细胞／孔）明显。电镜发现转染细胞有凋亡小体、核呈半月征。FCM、TUNEL均能检测到转染细胞凋亡发生率明显高于对照细胞（P＜0.001）。PCR及原位杂交表明转染细胞有TK基因整合和表达。体内实验表明GCV能明显抑制转染细胞接种的肿瘤，而亲代细胞接种的肿瘤未受抑制。结论转TK基因细胞在体内外都获得了对GCV的敏感性。TK／GCV系统杀灭肿瘤可能与诱导细胞凋亡有关。GCV能在活体内抑制转TK基因细胞裸鼠移植瘤生长。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱桂生	第三军医大学新桥医院呼吸疾病研究所	591	5662	33.0	52.0
2	陈维中	第三军医大学新桥医院呼吸疾病研究所	39	244	9.0	13.0
3	黄桂君	第三军医大学新桥医院呼吸疾病研究所	96	478	11.0	16.0
4	郭先健	第三军医大学新桥医院呼吸疾病研究所	31	200	8.0	12.0
5	何祥梁	第一军医大学珠江医院呼吸科	8	16	3.0	3.0
6	何雪花	第一军医大学珠江医院呼吸科	3	7	2.0	2.0
7	李淑萍	第三军医大学新桥医院呼吸疾病研究所	11	16	2.0	3.0