查菲埃立克体120kDa抗原蛋白基因的克隆与表达

• 作者: 严延生 于恩庶 王惠榕 翁育伟 陈亮
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 查菲埃立克体 膜蛋白抗原 基因克隆 表达
• 年，卷（期）: 2001,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 13-16
• 页数: 4页
• 分类号: R376
• 字数: 3309字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2001.04.004

摘要

目的克隆查菲埃立克体120kDa膜表面免疫决定性蛋白基因,并使之在原核表达系统中表达.方法查菲埃立克体分离株(91HE17)感染DH82细胞40天后收集DH82细胞.根据查菲埃立克体P120蛋白基因序列设计特异性引物,套式PCR扩增查菲埃立克体P120蛋白基因部分片段,将PCR扩增产物用BamHⅠ和EcoRⅠ限制性内切酶双酶切后与pUC18载体连接,在获得阳性克隆子后用限制性内切酶将克隆片段切下,定向插入原核表达载体pProEX HTb构建pProEX HTb/P120重组质粒.将重组质粒转化E coli DH5α,并使之在IPTG的诱导下进行蛋白质表达.结果裁短成1080bp的查菲埃立克体P120蛋白基因克隆到pUC18载体,用IPTG诱导pProEX HTb/P120重组质粒转化的E.coli DH5α,表达一分子量大小约为47kDa的融合蛋白.结论查菲埃立克体120kDa抗原蛋白基因能在原核表达系统中表达,为诊断试剂盒的研制及其它研究工作提供了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈亮		3	18	2.0	3.0
2	严延生		10	46	4.0	6.0
3	翁育伟		4	20	2.0	4.0
4	王惠榕		4	25	2.0	4.0
5	于恩庶		3	65	2.0	3.0