流感病毒RNA聚合酶的分离与纯化

• 作者: 曲章义 石浜明 谷鸿喜 赵育莹 郑树
• 来源期刊: 哈尔滨医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 流感病毒 RNA聚合酶 密度梯度
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 85-88
• 页数: 4页
• 分类号: R373.13
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1905.2001.02.003

摘要

目的建立分离、纯化流感病毒RNA聚合酶PB1、PB2和PA 3P蛋白的有效方法，为进一步研究3P蛋白的结构和功能奠定基础。方法用甘油、CsCl1及CsTFA不同介质的密度梯度超速离心法进行分离，用SDS－PAGE电泳及Western blot法检测3P蛋白，用尿素变性PAGE检测vRNA。结果用甘油密度梯度离心，可从病毒粒子中分离由NP、3P和RNA组成的RNP。将纯化的RNP用CsCl和甘油双组分不连续密度梯度离心，可形成NP和3P－RNA两部分，使NP与3P－RNA分离。进一步将3P－RNA在CsTFA－甘油双组分不连续密度梯度介质中进行超速离心，可有效地将3P与RNA分离，获得较纯的3P蛋白。3P位于离心管的上半部分，而RNA则位于离心管的近底端部分。结论用甘油、CsCl－甘油和CsTFA－甘油分步超离心法可有效地从流感病毒粒子中纯化出高纯度的流感病毒RNA聚合酶。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑树	浙江大学肿瘤学研究所	227	2645	27.0	42.0
2	谷鸿喜	哈尔滨医科大学微生物学教研室	112	457	11.0	15.0
3	赵育莹	哈尔滨医科大学微生物学教研室	9	92	6.0	9.0
4	石浜明	哈尔滨医科大学微生物学教研室	1	23	1.0	1.0