LacZ基因在哺乳动物细胞中的稳定表达及其检测方法

• 作者: 周斌 张学光 徐宽枫 施勤 陈永井
• 来源期刊: 苏州大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: LacZ 哺乳动物细胞 稳定表达
• 年，卷（期）: 2002,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 641-643
• 页数: 3页
• 分类号: R394-3|Q75
• 字数: 2160字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-0399.2002.06.001

摘要

目的构建含有LacZ标记基因的真核表达载体和稳定表达LacZ的转基因细胞,并建立简易有效的检测方法.方法采用脂质体转染法将装有LacZ基因的真核表达载体pcDNA3 导入鼠成纤维细胞L929,G418筛选LacZ基因稳定表达细胞株,并应用超声波破碎和贴壁细胞悬浮培养的方法来检测转基因细胞的转染率及目的蛋白的表达.结果成功构建了稳定表达LacZ 基因的转基因细胞,超声波破碎后其上清与β-半乳糖苷酶(LacZ)的底物X-gal 反应显兰色;铺有固体琼脂粉的平皿中细胞培养至第4天开始显兰色,并随时间的延长,比率增加,最终可高达100%.结论 LacZ基因在哺乳动物细胞中可稳定表达,建立的检测方法具有简单及重复性好的特点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张学光	苏州大学医学生物技术研究所	399	1957	18.0	24.0
2	施勤	苏州大学医学生物技术研究所	55	280	9.0	13.0
3	陈永井	苏州大学医学生物技术研究所	78	388	11.0	14.0
4	周斌	苏州大学医学生物技术研究所	17	39	4.0	5.0
5	徐宽枫	苏州大学医学生物技术研究所	6	67	5.0	6.0