芥菜新型几丁质酶基因在酵母(Pichia pastoris)中的分泌表达

• 作者: 冯兰香 欧阳石文 谢丙炎 赵开军
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 酵母 基因表达 BjCHI1基因 几丁质酶
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 33-35
• 页数: 4页
• 分类号: S6
• 字数: 2809字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2002.01.008

摘要

BjCHII基因是从芥菜(Brassicajuncea)中克隆的1个新型几丁质酶基因,编码含2个几丁质结合域的几丁质酶.本研究曾试图在大肠杆菌中表达该基因而未成功,因此试在酵母中表达.按照BjCHI1 cDNA全序列设计特异引物,通过PCR扩增获得成熟肽第1密码子至最后密码子之间的片段,克隆到载体pPIC9K上,测序验证无误后,转化酵母KM71.获得6个抗1.0 mg/mL遗传霉素(G418)水平的阳性转化子.PCR鉴定表明外源基因已经整合到酵母染色体上.此6个菌株经初步诱导,均表达出预期的蛋白质.对其中表达效率相对较高的KM71-17-1菌株作进一步的诱导表达,结果表明在诱导第3天后产生的外源蛋白达最大值.至此,成功地获得了BjCHI 1蛋白,为进一步研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢丙炎	中国农业科学院蔬菜花卉研究所	175	3639	30.0	51.0
2	欧阳石文	中国农业科学院蔬菜花卉研究所	16	377	9.0	16.0
3	冯兰香	中国农业科学院蔬菜花卉研究所	60	1317	23.0	34.0