细胞因子midkine基因的克隆及其转化甲醇酵母Pichia pastoris

• 作者: 张青云 王跃华
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: midkine Pichia pastoris pPic9k 电转化
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 677-680
• 页数: 4页
• 分类号: Q785
• 字数: 3077字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-6611.2005.06.009

摘要

目的克隆细胞因子midkine (MK)基因,并转化甲醇酵母Pichia pastoris.方法利用RT-PCR方法从人胃癌MGC803细胞总RNA中扩增MK cDNA,构建分泌表达载体pPic9k-MK,然后转入宿主菌GS115中,提取GS115的基因组DNA,用PCR法扩增鉴定阳性克隆.结果成功构建了分泌表达载体pPic9k-MK,并转入GS115中,筛选到抗4.0 mg/ml G418的重组菌株,鉴定出5个阳性克隆.结论 MK基因可以转入甲醇酵母Pichia pastoris中,为今后在Pichia pastoris中表达有活性的MK蛋白,并进一步研究其生物学功能和作用机制奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王跃华	山西省肿瘤医院病理科	25	102	6.0	9.0
2	张青云	北京大学临床肿瘤学院免疫研究室	27	116	5.0	9.0