建立巴马长寿老人经EBV转染永生细胞株的方法

• 作者: 史晓红 吕泽平 吴建洲 孙玉茹 孙逸平 庞国防 杨泽 潘尚领 胡才友 许代娣 郑陈光 陈建超 韦勇 龙桂芳
• 来源期刊: 广西医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: EB病毒 长寿老人 细胞培养 生细胞株
• 年，卷（期）: 2002,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 624-626
• 页数: 3页
• 分类号: Q343.6
• 字数: 2737字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-930X.2002.05.007

摘要

目的:建立用EBV转化长寿人群外周血淋巴细胞永生细胞株(LCL)的方法.方法:用EBV转染8份百岁以上健康老人,20份89～99岁健康老人及8份66岁以下健康人的血样共36份.采用20%FBS RPMI1640培养液,配合环孢菌素A、植物血凝素(PHA),置37℃ 5%CO2培养箱内培养.结果:成功地获得24份永生细胞株(其中,百岁老人6份,89～99岁老人12份,66岁以下6份).结论:采血后24～48 h之间接种,转化成功率高.转染后2～3周,大部分标本出现细胞分裂、变形,标志着转化成功.超过5周仍无细胞分裂者即发生细胞凋亡.PHA有缓解细胞凋亡的作用,但不能使细胞分裂.污染是引起转染细胞株凋亡的主要因素.严格的无菌操作、保持培养细胞的适当密度、适时换液、打散较大的细胞克隆团是培养LCL的关键.