绿色荧光蛋白逆转录病毒载体的构建及其表达

• 作者: 刘伟 刘德莉 吴娟娟 曹谊林 胡晓洁
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组逆转录病毒载体 绿色荧光蛋白 细胞标记
• 年，卷（期）: 2002,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 424-425,438
• 页数: 3页
• 分类号: Q782
• 字数: 1906字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2002.05.003

摘要

目的实现绿色荧光蛋白(GFP)报告基因在组织工程化细胞中的高效、稳定、长久表达.方法构建重组逆转录病毒表达载体RV-GFP, 通过PT67包装细胞克隆, 经G418筛选、扩增, 获得大量含GFP基因的病毒液, 并直接感染靶细胞.结果转染细胞于48 h后,在荧光显微镜蓝光激发波长下, 可发出明亮的绿色荧光, 转染率达20%～50%.感染靶细胞内GFP的有效表达可维持2个月.结论构建的重组逆转录病毒GFP载体, 可作为组织工程化细胞标记, 用于细胞动态研究, 其方法简便、灵敏、可靠.