PCR指纹图技术筛选鼠疫耶尔森菌种特异性探针的研究

• 作者: 宋亚军 宫占威 张敏丽 徐涛 杨瑞馥 王津 郭兆彪
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 鼠疫耶尔森菌 PCR指纹图 杂交 探针
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 检测技术
• 页码范围: 465-468
• 页数: 4页
• 分类号: R446
• 字数: 3516字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2002.04.036

摘要

目的利用PCR指纹图技术筛选细菌种特异性探针,探索利用PCR指纹图技术实现病原菌通用检测的可能性. 方法以鼠疫耶尔森菌为实验对象,利用REP-1和REP-2引物对在非严谨的条件下进行PCR指纹图扩增;将所有扩增片段纯化后,克隆至pGEM-T载体,转化大肠杆菌JM109;用生物素化的载体引物扩增克隆化片段,进行末端标记;在硝酸纤维素膜上固定鼠疫杆菌的染色体DNA以及相应对照菌株的染色体DNA,以末端标记的扩增产物进行杂交,通过生物素-链霉亲和素-辣根过氧化物酶系统显色,判断扩增片段的特异性. 结果经杂交筛选,发现1个长度约为900bp的扩增具有较好的杂交特异性片段,将序列与鼠疫耶尔森菌已完成的基因组序列比较,仅发现4个核苷酸的差异;根据这段序列设计的引物对可以特异性地扩增鼠疫耶尔森菌的模板. 结论利用PCR指纹图技术成功筛选到一段鼠疫耶尔森菌的种特异性探针,为细菌通用检测技术的研究开辟了新的思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宫占威		70	285	9.0	11.0
2	张敏丽		38	388	12.0	18.0
5	郭兆彪		47	474	13.0	20.0
8	王津		30	378	11.0	18.0
11	徐涛	军事医学科学院基础医学研究所	13	151	3.0	12.0
12	宋亚军		41	437	13.0	19.0