中国株HIV-1结构蛋白基因gag与gp120在巴斯德毕赤酵母中的融合表达

• 作者: 张应玖 江文正 王宏伟 金宁一 金洪涛
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HIV-1 结构蛋白 毕赤巴斯德酵母 融合表达
• 年，卷（期）: 2002,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 426-428
• 页数: 3页
• 分类号: R373.9
• 字数: 2448字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2002.05.004

摘要

目的将中国流行株B亚型HIV-1结构蛋白基因gag和gp120在巴斯德毕赤酵母中进行融合表达.方法以酵母分泌型表达质粒pPIC9为载体, 构建含HIV-1 gag和gp120嵌合基因的重组酵母表达质粒pPICGP.用Sac I 将pPICGP线性化后, 电转化巴斯德毕赤酵母GS115, 用PCR的方法鉴定阳性酵母转化子.阳性转化子在巴斯德毕赤酵母中用甲醇进行诱导表达, 表达产物以SDS-PAGE和Western blot进行分析, 并对阳性菌株的遗传稳定性进行研究. 结果 12个酵母转化子中共筛选到了8个阳性酵母转化子, 其整合率为66.7%.SDS-PAGE和Western blot分析显示, 在相对分子质量(Mr)为57 000处有1条特异蛋白带, 且能与抗p24单抗(mAb)和抗gp120mAb发生反应.酵母转化子在YPD培养基上传代10次后, 其外源基因未丢失.结论在巴斯德毕赤酵母中成功地表达了HIV-1 gag-gp120嵌合基因, 且表达蛋白具有特异性, 但其Mr较预计计算的值要小, 说明嵌合基因中的gp120基因只有部分进行了表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金宁一	解放军军需大学基因工程实验室	138	903	16.0	21.0
2	王宏伟	解放军军需大学基因工程实验室	19	125	7.0	10.0
3	江文正	解放军军需大学基因工程实验室	37	381	9.0	18.0
4	张应玖	吉林大学生命科学学院	44	194	7.0	11.0
5	金洪涛	解放军军需大学基因工程实验室	11	57	5.0	7.0