人乳头瘤病毒18型L1-E6、L1-E7嵌合基因表达载体的构建及表达

• 作者: 司履生 李昂 来宝长 王一理 王艳 耿宜萍 郑瑾
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人乳头瘤病毒18型 表达载体 定点突变
• 年，卷（期）: 2002,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 558-561
• 页数: 4页
• 分类号: R373.9
• 字数: 4942字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2002.06.013

摘要

目的构建HPV 18 L1-E6、L1-E7嵌合基因的表达载体, 并在CHO细胞中表达.方法克隆HPV 18 L1-E6和L1-E7基因, 插入中介载体pGEMT-Easy中并测序鉴定.采用PCR定点突变法, 突变L1-E6、L1-E7基因序列中与转化作用相关的位点, 分别与L1基因连接后插入真核表达载体pVAX1, 构建真核表达质粒pVAX1-L1E6Mxx、 -L1E7Mxx.用磷酸钙沉淀法, 转染CHO细胞, 以抗HPV-18L1、抗E6和抗E7特异性单克隆抗体(mAb)做ELISA和免疫细胞化学法检测.结果 ELISA检测显示, 转染各种pVAX1-L1E6Mxx、 -L1E7Mxx融合蛋白表达质粒的细胞提取物的P-N值均>2.1; 免疫细胞化学检测, 在胞浆、 胞核可见棕黄色颗粒.结论所构建的pVAX1-L1E6Mxx-E7Mxx融合蛋白表达质粒, 可在转染细胞内表达相应的L1-E6Mxx和L1-E7Mxx蛋白, 为今后进行DNA疫苗的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李昂	西安交通大学生命科学与技术学院肿瘤研究所	81	451	12.0	17.0
2	王一理	西安交通大学生命科学与技术学院肿瘤研究所	112	527	9.0	17.0
3	耿宜萍	西安交通大学生命科学与技术学院肿瘤研究所	18	77	6.0	7.0
4	来宝长	西安交通大学生命科学与技术学院肿瘤研究所	20	89	7.0	8.0
5	郑瑾	西安交通大学生命科学与技术学院肿瘤研究所	30	90	5.0	8.0
6	王艳	西安交通大学生命科学与技术学院肿瘤研究所	24	177	7.0	12.0