幽门螺杆菌cagA克隆表达

• 作者: 何利华 周建嫦 张建中 张茂俊 徐采朴 盛涛 肖文平 郭浩岩
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 cagA 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 分子生物技术
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: R378.99
• 字数: 2850字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-5673.2002.04.001

摘要

克隆表达4株幽门螺杆菌的cagA基因,以方便地获得大量CagA蛋白和重组表达质粒,为临床诊断CagA阳性幽门螺杆菌感染,以及进一步研究不同类型CagA功能及其与疾病关系提供材料.PCR扩增幽门螺杆菌的ca-gA基因,克隆至PinPointTM Xa-1 T载体,酶切鉴定连接方向,IPTG诱导正向连接克隆表达CagA融合蛋白并进行SDS-PAGE和Western blots鉴定.结果显示PCR扩增得到3.5～3.8kb的cagA基因,PCR及酶切鉴定得到正向连接的重组克隆,SDS-PAGE及Western blots证实正向连接的重组克隆表达CagA融合蛋白.构建了4种cagA的重组表达质粒,通过转化同一宿主菌可研究不同CagA的功能和致病性差异;通过亲和层析纯化融合蛋白可获取大量CagA蛋白,用于血清学诊断CagA阳性幽门螺杆菌感染,及不同抗原性CagA与疾病之间的关系.