携TGFβ 1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体的构建与鉴定

• 作者: 姚欣 李文录 畅继武 马腾骧
• 来源期刊: 天津医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 转化生长因子β1 复制缺陷型逆转录病毒载体 反义RNA
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 22-25
• 页数: 4页
• 分类号: R322.4+1+R782
• 字数: 3882字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-8147.2002.01.008

摘要

目的:构建携TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体.方法:以逆转录病毒pRevTRE为载体,采用平末端连接法获得含人TGFβ1cDNA 3'-端活性肽编码基因正、反向插入的重组病毒质粒,脂质体介导转染包装细胞PA317,获得含TGFβ1正、反义RNA的复制缺陷型逆转录病毒载体pRevTβ和pRevTβ-AS,感染NIH3T3细胞,测定病毒滴度.分别转染膀胱癌 EJ 细胞,通过Southern-blot和半定量RT-PCR方法评价载体整合及表达效率.结果:pRevTβ、pRevTβ-AS载体病毒滴度分别为0.84、0.88×105CFU/ml,EJ 细胞外源基因的整合率为100%,正、反义基因转染细胞内TGFβ1mRNA的相对转录水平为1.89和0.35.结论:构建的携TGFβ1正、反义基因的复制缺陷型逆转录病毒载体符合细胞体外转染要求,能与肿瘤细胞高效整合,有效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李文录	天津医科大学肿瘤医院盆腔泌尿科	30	136	6.0	9.0
2	畅继武		55	160	7.0	9.0
3	马腾骧		65	246	8.0	12.0
4	姚欣	天津医科大学肿瘤医院盆腔泌尿科	20	102	6.0	8.0