p16基因甲基化特异检测方法的建立及其初步应用

• 作者: 刘晓颖 周青 夏瑞祥 桂淑玉 汪惠园 汪渊 袁凌云 鲁云霞
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 基因,p16 甲基化
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 18-21
• 页数: 4页
• 分类号: R349.11|R394.2|R446.9
• 字数: 3686字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2002.01.007

摘要

目的建立p16基因中CpG岛的甲基化分析方法,即甲基化特异的PCR(methylation-specific polymerase chain reaction, MSP)方法及其初步应用. 方法用亚硫酸氢钠修饰变性后的被测DNA,随之进行甲基化、非甲基化特异的PCR扩增.应用MSP法分析白血病患者的白细胞p16基因5′CpG岛的甲基化变异情况. 结果用加热法变性DNA,亚硫酸氢盐修饰DNA,Wizard DNA 纯化树脂除盐、纯化修饰后的DNA都获得了成功,并建立了MSP分析p16基因甲基化的方法.白血病患者的白细胞p16基因的5′CpG岛有一定比例的甲基化变异.结论 MSP是一种较为简便、敏感且具有高度特异性的检测任何基因的CpG区域甲基化位点的分析方法.