应用长链RT-PCR法扩增我国登革2、4型病毒株全长cDNA

• 作者: 于曼 杨佩英 秦鄂德 胡志君 范宝昌 赵卫 陈水平
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 登革病毒 全长cDNA 长链RT-PCR
• 年，卷（期）: 2002,（5）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 485-488
• 页数: 4页
• 分类号: R37
• 字数: 3740字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2002.05.004

摘要

目的采用长链RT-PCR技术扩增登革2型及4型病毒基因组全长cDNA,为构建登革病毒全长cDNA克隆、表达,深入阐明致病机理及探索新型疫苗奠定基础. 方法根据已测定的登革2、4型病毒全基因组序列,设计上下游引物.从感染登革病毒的乳鼠脑中提取病毒基因组RNA,采用长链RT-PCR技术进行扩增.为检验扩增产物的特异性,以PCR产物为模板扩增覆盖基因组的10个片段.将含有复杂二级结构的5′非编码区的扩增片段,在377A型自动测序仪进行序列分析. 结果扩增出登革2、4型病毒基因组全长近11kb cDNA分子,非编码区测序结果表明扩增产物为登革2、4型病毒所特有. 结论利用长链RT-PCR首次成功扩增出登革病毒全长cDNA分子.