基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取       
摘要:
目的:建立扩增登革2型病毒基因组全长cDNA的融合PCR法,为深入探讨病毒基因组的结构与功能提供有效的技术途径.方法:根据我国登革2型病毒D2-43株序列设计引物,首先采用长链RT-PCR技术扩增病毒基因组5′及3′半分子,然后以半分子采用融合PCR法将两个半分子构建成全长cDNA分子.为进一步证实所构建全长cDNA分子的特异性,再以融合PCR产物为模板扩增5′非编码区序列,与pGEM-T载体连接,在377A型自动测序仪进行序列分析.结果:通过对逆转录反应及PCR扩增条件的优化,建立了制备大片段cDNA及构建全长cDNA分子的融合PCR方法.扩增的我国登革2型病毒的5′及3′半分子的长度均为5 kb左右,采用融合PCR方法制备的全长cDNA长约11 kb,与预期大小一致,非编码区测序结果表明扩增产物为D2-43所特有.结论:所建立的融合PCR方法是构建登革病毒基因组全长cDNA的有效技术.
推荐文章
登革2型病毒中国分离株感染性全长cDNA克隆的构建与鉴定
登革病毒
感染性全长cDNA克隆
恢复病毒
猪圆环病毒2型环介导等温扩增(LAMP)检测方法的研究
猪圆环病毒2型(PCV-2)
环介导等温扩增(LAMP)
敏感性
特异性
快速检测
内容分析
关键词云
关键词热度
相关文献总数  
(/次)
(/年)
文献信息
篇名 扩增我国登革2型病毒全长cDNA分子的融合PCR方法
来源期刊 军事医学科学院院刊 学科 医学
关键词 登革热病毒 全长cDNA 长链逆转录PCR 融合PCR
年,卷(期) 2001,(2) 所属期刊栏目 技术方法
研究方向 页码范围 137-139
页数 3页 分类号 R373.33
字数 2843字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1674-9960.2001.02.016
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 秦鄂德 军事医学科学院微生物学流行病学研究所 75 476 11.0 17.0
2 于曼 军事医学科学院微生物学流行病学研究所 43 174 7.0 9.0
3 陈水平 军事医学科学院微生物学流行病学研究所 37 147 7.0 9.0
4 胡志君 军事医学科学院微生物学流行病学研究所 16 70 6.0 8.0
5 范宝昌 军事医学科学院微生物学流行病学研究所 17 91 6.0 9.0
6 赵卫 军事医学科学院微生物学流行病学研究所 16 106 6.0 10.0
7 杨佩英 军事医学科学院微生物学流行病学研究所 27 182 8.0 12.0
传播情况
(/次)
(/年)
引文网络
引文网络
二级参考文献  (6)
共引文献  (4)
参考文献  (7)
节点文献
引证文献  (14)
同被引文献  (36)
二级引证文献  (33)
1990(1)
  • 参考文献(0)
  • 二级参考文献(1)
1994(1)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(0)
1995(1)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(0)
1996(1)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(0)
1997(4)
  • 参考文献(2)
  • 二级参考文献(2)
1998(2)
  • 参考文献(0)
  • 二级参考文献(2)
1999(1)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(0)
2000(2)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(1)
2001(0)
  • 参考文献(0)
  • 二级参考文献(0)
  • 引证文献(0)
  • 二级引证文献(0)
2002(1)
  • 引证文献(1)
  • 二级引证文献(0)
2004(1)
  • 引证文献(0)
  • 二级引证文献(1)
2005(1)
  • 引证文献(0)
  • 二级引证文献(1)
2006(4)
  • 引证文献(4)
  • 二级引证文献(0)
2007(3)
  • 引证文献(2)
  • 二级引证文献(1)
2008(3)
  • 引证文献(2)
  • 二级引证文献(1)
2009(1)
  • 引证文献(0)
  • 二级引证文献(1)
2010(4)
  • 引证文献(2)
  • 二级引证文献(2)
2011(1)
  • 引证文献(0)
  • 二级引证文献(1)
2012(9)
  • 引证文献(1)
  • 二级引证文献(8)
2014(4)
  • 引证文献(2)
  • 二级引证文献(2)
2015(4)
  • 引证文献(0)
  • 二级引证文献(4)
2016(1)
  • 引证文献(0)
  • 二级引证文献(1)
2017(3)
  • 引证文献(0)
  • 二级引证文献(3)
2018(1)
  • 引证文献(0)
  • 二级引证文献(1)
2019(6)
  • 引证文献(0)
  • 二级引证文献(6)
研究主题发展历程
节点文献
登革热病毒
全长cDNA
长链逆转录PCR
融合PCR
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
军事医学
月刊
1674-9960
11-5950/R
大16开
北京太平路27号
82-757
1956
chi
出版文献量(篇)
4313
总下载数(次)
13
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
论文1v1指导