登革1型病毒广州06株基因组全长感染性克隆的构建与鉴定

• 作者: 于曼 刘然 姜涛 秦成峰 秦鄂德 邓永强 陈水平 韩剑峰
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: 登革热病毒 全长cDNA克隆 恢复病毒
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 323-327
• 页数: 5页
• 分类号: R373.33
• 字数: 4751字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2008.04.007

摘要

目的:构建本室新分离的登革1型病毒广州06株基因组全长感染性cDNA克隆,为深入研究登革病毒致病机制奠定基础.方法:根据登革1型病毒广州06株基因组全序列中单一酶切位点设计特异引物,分别扩增并克隆5个病毒亚基因组cDNA片段,将其逐一拼接连入pWSK 29低拷贝质粒载体,获得病毒全长cDNA克隆,并将其体外转录为RNA,再转染细胞获得恢复病毒.进一步通过RT-PCR扩增病毒5′和3′非编码区序列和特异性间接免疫荧光对其恢复病毒进行鉴定.结果和结论:构建获得登革1型病毒广州06株基因组全长感染性cDNA克隆,其恢复病毒与野生型病毒具有相似的生物学特性.