表达mFasL的新型双顺反子逆转录病毒基因转移体系的建立

• 作者: 刘凌波 徐之良 王良利 胡中波 邹萍
• 来源期刊: 华中科技大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: mFasL 逆转录病毒载体 基因转移 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 136-139
• 页数: 4页
• 分类号: R349.6
• 字数: 3011字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2002.02.008

摘要

为建立表达小鼠Fas配体(mFasL)的内部核糖体进入位点(IRES)串联的双顺反子新型逆转录病毒基因转移体系,用基因重组技术将mFasL cDNA基因构建到IRES双顺反子逆转录病毒载体(PLXIN)中,脂质体法将此重组质粒PLFIN和空载体PLXIN分别转染包装细胞(PA317),经G418筛选出抗性包装细胞克隆,基因组DNA PCR测定基因整合情况.并将抗性PA317克隆培养上清感染小鼠成纤维细胞系(NIH3T3),筛选出高滴度的PA31 7细胞系;用流式细胞术测定筛选的NIH3T3细胞目的基因表达状况;以抗性NIH3T3和Fas+Yac-1细胞共培养法检测目的基因的生物学活性.筛选出12个PLFIN转染的PA317细胞克隆中,最高产毒效价为8.5×105CFU(colony-forming-umt);经此上清感染、筛选出的NIH3T3细胞,高表达mFasL(阳性率高于对照组52.54%);且能显著诱导Fas+Yac-1细胞凋亡(凋亡率高于对照组49% 说明成功建立了表达mFasL的双顺反子逆转录病毒基因转移体系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹萍	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病学研究所	258	977	13.0	18.0
2	徐之良	武汉大学医学院附属人民医院儿科	77	288	9.0	12.0
3	胡中波	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病学研究所	14	80	5.0	8.0
4	刘凌波	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病学研究所	45	92	6.0	8.0
5	王良利	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病学研究所	4	8	2.0	2.0