大鼠肝脏<em>3</em> Alpha-羟类固醇脱氢酶cDNA的克隆与表达

• 作者: 冯伟华 周瑾 周雍 张建鹏 张昕炯 胡惠民
• 来源期刊: 中华国际医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 3 Alpha-羟类固醇脱氢酶 克隆 序列分析 基因表达
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 314-317
• 页数: 4页
• 分类号: Q786|Q789
• 语种: 中文

摘要

目的克隆大鼠肝脏3 Alpha-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD)cDNA,构建大肠杆菌表达质粒pET-30a/3α-HSD,并诱导表达含6个组氨酸标记的pET-30a/3α-HSD融合蛋白.方法从大鼠肝脏组织中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增出大鼠3α-HSD cDNA,克隆于pGEM-T载体中,测序筛选后,将正确序列的3α-HSD基因Bam H Ⅰ/Xho Ⅰ片段定向插入融合基因表达载体pET-30a的相应克隆位点上,构建重组质粒pET-30a/3α-HSD,并转化大肠杆菌BL21-Gold(DE3)pLysS.结果和结论 pGEM-T/3α-HSD序列分析发现,获得的大鼠肝脏3α-HSD cDNA在起始密码后的第814位碱基由T突变为C,与文献报道的仅一个碱基差别.构建的表达载体pET-30a/3α-HSD在大肠杆菌BL21-Gold (DE3)pLysS中能表达出融合蛋白,为进一步实验研究和临床应用创造了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯伟华	第二军医大学生物化学与分子生物学教研室	46	727	15.0	26.0
2	胡惠民	第二军医大学生物化学与分子生物学教研室	21	97	7.0	9.0
3	张建鹏	第二军医大学生物化学与分子生物学教研室	41	597	14.0	24.0
4	周雍	第二军医大学生物化学与分子生物学教研室	6	85	4.0	6.0
5	周瑾	第二军医大学生物化学与分子生物学教研室	21	64	4.0	7.0
6	张昕炯	第二军医大学生物化学与分子生物学教研室	1	0	0.0	0.0