人BLyS基因克隆、表达和抗人BLyS单克隆抗体的制备

• 作者: 张志方 张春艳 林学颜 潘敬运
• 来源期刊: 中山医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: BLyS 抗体,单克隆 T淋巴细胞
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 176-179,207
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11|R331.3
• 字数: 3814字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2002.03.005

摘要

[目的]研制抗人BLyS单克隆抗体,以进一步探讨人BLyS与自身免疫性疾病的关系.[方法]将人BLyS基因克隆到融合蛋白原核表达载体pGEX-4T-1中,构建重组质粒pGEX-4T-1/hBLyS,用此重组质粒转化大肠杆菌BL21,加IPTG诱导大肠杆菌表达GST-hBLyS融合蛋白,用此融合蛋白免疫BALB/c鼠,取鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,用ELISA法筛选阳性克隆,用免疫印迹和流式细胞仪进一步鉴定抗体的特异性.[结果]重组质粒双酶切结果和DNA序列测定以及表达蛋白SDS-PAGE电泳结果表明,pGEX-4T-1/hBLyS重组质粒可以正确表达GST-hBLyS融合蛋白;ELISA、免疫印迹和流式细胞仪检测结果表明,1c6杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体可以特异性结合人T淋巴细胞膜表面BLyS的膜外区,属于IgG2b亚类.[结论]所获得的单克隆抗体具有能够结合人T淋巴细胞上的BLyS特异性,可用于研究人BLyS与自身免疫性疾病的关系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林学颜	中山大学中山医学院免疫学教研室	9	21	3.0	4.0
2	潘敬运	中山大学中山医学院生理学教研室	15	73	5.0	8.0
3	张志方	中山大学中山医学院生理学教研室	10	25	3.0	4.0
4	张春艳	中山大学中山医学院免疫学教研室	12	29	4.0	5.0