小鼠胚胎成纤维细胞差异表达基因的筛选

• 作者: 任爱辉 尉承泽 崔春萍 张咏 杨滔 赵士富 鱼咏涛
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 胚胎学 干细胞 纤维母细胞 核酸杂交
• 年，卷（期）: 2002,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 965-968
• 页数: 4页
• 分类号: Q75
• 字数: 3791字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2002.11.008

摘要

应用微阵列杂交法对培养前、后的小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)mRNA进行检测,找到24类差异表达的基因,为进一步筛选MEF可能表达的新基因,对培养前(driver)、后(tester)的MEF mRNA进行抑制性消减杂交,产物与pGEM-T载体连接构建cDNA消减文库并转染JM109大肠杆菌.随机挑取阳性克隆,PCR扩增后对所得的差异表达基因进行测序及生物信息学分析.在随机挑取的145个克隆中,测得了128条EST序列,经生物信息学分析,它们代表了42类不同基因和3条新基因序列.结果表明,培养后MEF相对于培养前胚胎成纤维细胞确实存在差异表达基因群.提示,进一步的实验研究可能找出对ES细胞增殖分化有重要调控作用的基因或基因群.